Resúmenes

XXIV Congreso Sociedad Chilena de Fitopatología

1, 2 y 3 de Diciembre de 2015

Organizan:

Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA Centro Regional de Investigación La Platina

Viña del Mar – Chile

Seminarios

Comunicaciones Orales

  • Actualización sobre la situación del Control Oficial de Plum Pox Virus raza D en Chile, Servicio Agrícola y Ganadero
  • Virus y viroides presentes en manzano (Malus domestica Bork) en Chile
  • Caracterización de Apple mosaic virus, ApMV; Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV y Tomato ringspot virus, ToRSV en huertos de manzano de la Región del Maule
  • Detección y caracterización molecular de fitoplasmas asociados al peral en Chile
  • Detección y caracterización molecular de fitoplasmas asociados a frutales de carozo en Chile
  • Detección y caracterización de los viroides que afectan a la vid en Chile
  • Nuevo virus afecta el cultivo de la lechuga (Lactuca sativa L.) en las regiones de Coquimbo y Metropolitana
  • Caracterización molecular de un fitoplasma asociado a filodia y escoba de brujas de frutilla (Fragaria x ananasa)
  • Prevalencia de dos Begomovirus, TYVSV y ToLDeV, en cultivo de Tomate en la Región de Arica y Parinacota
  • Prevalencia de virus en lilium entre Regiones de Valparaíso a Los Lagos en Chile
  • Detección molecular y serológica de Lily symptomless virus en bulbos de lilium
  • Obtención de bulbillos de lilium libres de virus LSV y LMoV, mediante cultivo de meristemas y termoterapia en el cultivar “Manissa”
  • Detección de PVY y PLRV en Myzus persicae para determinar la infectividad en la dinámica de poblaciones de áfidos vectores
  • Caracterización biológica y molecular de aislados chilenos del Virus S de la papa (PVS) provenientes de las regiones de Los Ríos y Los Lagos
  • Detección rápida de Olpidium spp. en muestras de suelos y raíces
  • Ralstonia solanacearum Bv.2 agente causal de marchitez bacteriana de la papa en Araucanía (2013-2015)
  • Primer reporte de Sphaerulina musiva (Peck) Quaedvlieg, Verkley & Crous causando manchas foliares en álamo en Chile
  • Patogenicidad, agresividad y diversidad genética de especies de Gaeumannomyces graminis y Phaeosphaeria afectando trigo en Chile
  • Susceptibilidad/tolerancia de variedades e híbridos comerciales de raps canola, al pié negro o “foma” (Leptosphaeria maculans), en el sur de Chile
  • Falsos positivos en detección molecular de Candidatus Liberibacter en Citrus asociados a bacterias endófitas
  • Determinación de Botrytis cinerea en aislados monospóricos provenientes de parronales de la zona central de Chile
  • Uso de técnica convencional y qPCR como predictores de incidencia de Botrytis cinerea en uva de mesa cv. Thompson Seedless en cosecha y poscosecha
  • Diplodia seriata causando pudriciones de manzana cvs. Fuji y Pink lady de pre-cosecha en la Región del Maule
  • Estatus actual de la muerte regresiva de brazos en Kiwi cv. Hayward in Chile
  • Caracterización molecular de aislamientos de hongos del genero Fusarium asociados a Aguacate, en el Valle del Cauca-Colombia
  • Detección temprana no destructiva de Chondroestereum purpureum, agente causal del Plateado en manzano
  • Identificación discriminativa de la variante filogenética de Pseudomonas syringae pv. actinidiae biovar 3 presente en Chile
  • Cancro bacteriano del kiwi causado por Pseudomonas syringae pv. actinidiae: origen de la epifítia en Chile
  • Análisis multilocus de aislados de Pseudomonas syringae pv. actinidiae que presentan diferentes grados de patogenicidad
  • Efectividad de Fluazinam en el control de Neofusicoccum australe en arándanos
  • Ocurrencia de aislados de Venturia inaequalis resistente a trifloxyestrobin en la Región del Maule
  • Fungicidas VITISEAL y SPUR SHIELD (BSP-100) previenen el desarrollo de lesiones causadas por Botryosphaeriaceae en vides
  • Línea base de sensibilidad de aislados chilenos de Botrytis cinerea recuperados desde uva de mesa a fluopyram
  • Caracterización genética de aislados de Botrytis spp. de distinto nivel de sensibilidad a fungicidas inhibidores de SDH en arándanos
  • Determinación de sensibilidad a cyprodinil + fludioxonil, genotipos y fenotipos de aislados de Botrytis cinerea obtenidos desde viveros de eucalipto
  • Determinación de la sensibilidad de Alternaria solani a los fungicidas QoI, boscalid y difenoconazole in vitro y su relación con la sustitución F129L
  • Evaluación de la interacción susceptibilidad varietal y dosis de fungicida en el control de Tizón tardío (Phytophthora infestans) en el cultivo de la papa
  • Sedaxane: Nueva molécula fungicida de Syngenta exclusiva para la desinfección de semillas en distintos cultivos
  • Estrategia de control biológico para el control de pudrición gris y pudrición del racimo de uva de mesa
  • Mezclas antagonistas para control de Neofusicoccum australe y Diplodia seriata en vid vinífera cv. Cabernet Sauvignon
  • Capacidad antagónica in vitro e identificación molecular de microorganismos aislados de un suelo y un compost supresivo a caída de plantas
  • Hongos patógenos asociados a malezas Genista monspessulana y Cytisus scoparius y susceptibilidad en especies de interés forestal
  • Evaluación de la eficacia de los productos biológicos Coraza® y Mamull®, en el control de enfermedades de madera, en vides
  • Evaluación de Coraza® en la extinción de cancros causados por Pseudomonas syringae en Cerezo
  • Elicitación de respuesta defensiva en plántulas de vid cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay
  • Antagonistas fúngico y bacteriano sobre hongos de la familia Botryosphaeriaceae promueven desarrollo en plántulas de vid cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay
  • Relaciones ecológicas entre comunidades fúngicas de la corona de trigo y genotipos de Pseudomonas spp. productoras de 2,4-diacetilfloroglucinol (2,4 DAPG) y fenazina (PCA)
  • Evaluación de cuatro biofungicidas y dos aislamientos del género Trichoderma contra Botrytis cinérea
  • Identificación de especies del género Meloiodgyne en el Valle Central de Chile y su interacción con portainjertos de frutales de Carozo
  • Riesgo de infestación por Nemátodo dorado, en predios de la agricultura familiar campesina del área libre de enfermedades cuarentenarias de la papa
  • Detecciones relevantes de plagas fitopatológicas durante período agosto 2014 y 2015. Programa Vigilancia Fitosanitaria Agrícola, Servicio Agrícola y Ganadero
  • Manual Interactivo de la Papa: nueva herramienta de transferencia tecnológica INIA
  • Comunicaciones Póster

     

     

    Seminarios

    Inocuidad Microbiológica de los Alimentos

    Microbiological Food Safety Guillermo Figueroa Instituto de Nutrición y Tecnología de los Alimentos (INTA) de la Universidad de Chile E-Mail: gfiguero@inta.uchile.cl

    Miles de millones de personas alrededor del mundo sufren enfermedades provocadas por el consumo de alimentos contaminados. Resolver esto se encuentra hoy en la agenda de todos los gobiernos. Se requiere un cambio en la orientación de la investigación científica en el área de los alimentos. Es indispensable cubrir todo el ámbito de la cadena agroalimentaria. El origen de la contaminación biológica, química o física puede ocurrir en cualquiera de las etapas de la cadena productiva: elaboración, producción, distribución, almacenamiento y consumo de los alimentos. Y de estos potenciales contaminantes los de mayor impacto en la salud pública mundial son de origen microbiano.

    La globalización creciente de los mercados, el crecimiento de la industria agroalimentaria y los cambios en los patrones de consumo han producido un aumento sostenido de los episodios de toxi-infección alimentaria y en las consecuencias de salud que esto conlleva, como un alta morbilidad y mortalidad. Esto es confirmado por las estadísticas publicadas por la Organización Mundial de la Salud, ya que miles de millones de personas alrededor del mundo sufren de enfermedades provocadas por el consumo de alimentos contaminados. Conforme a datos de la Administración de Alimentos y Drogas de los Estados Unidos, FDA, los patógenos que con mayor frecuencia causan enfermedades en el ámbito alimentario son Salmonella sp, Campylobacter jejuni, Shigella sp, Staphylococcus aureus, Escherichia coli 0157:H7 y Listeria monocytogenes. Los cuadros infecciosos más frecuentes son las toxi-infecciones alimentarias, y en menor medida otros como la hepatitis A y la fiebre tifoidea.

    Resolver el problema de la contaminación de los alimentos se encuentra hoy en la agenda de todos los gobiernos y preocupa a los consumidores en todo el mundo. Es clave el rol de los consumidores organizados que exigen, cada vez con mayor vigor, los alimentos de alta calidad nutricional y además cumplan con las normativas de inocuidad en todos sus aspectos. La disponibilidad de alimentos sanos e inocuos no sólo es parte de una política de país para dar protección a la población, sino también permite dar cumplimiento a los compromisos y tratados comerciales internacionales adquiridos que tienen gran influencia sobre su situación socioeconómica.

    Por este motivo al tema inocuidad de los alimentos se le ha dado un enfoque integrado en el que todos los participantes de la cadena productiva comparten responsabilidades específicas y con ello se abarca todo el sistema agroalimentario.

    Seminarios

    Aplicación de péptidos antimicrobianos contra importantes hongos fitopatógenos que afectan cultivos comerciales

    Application of Antimicrobial peptides against important fungal pathogen affecting commercial crops Eduardo Tapia1 ; Christian Montes1 ; Sebastián Godoy1 ; Maite Lopetegui2 ; Fabiola Altimira3 ; Gloria Arenas3 ; Humberto Prieto1 1 Laboratorio de Biotecnología, Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación La Platina 2 Ingeniería en Biotecnología, Universidad Nacional Andrés Bello. 3Doctorado en Biotecnología, Universidad Técnica Federico Santa María/Pontificia Universidad Católica de Valparaíso E-Mail: etapia@inia.cl

    Los péptidos antimicrobianos (PAM) son secuencias aminoacídicas cortas, anfipáticas y de alta cationicidad que se encuentran en distintos organismos, desde vegetales a moluscos. El espectro de acción de estas moléculas ha demostrado ser de gran amplitud, existiéndose a aplicaciones de biotecnología vegetal. En este trabajo se diseñaron genes sintéticos basados en secuencias aminoacídicas del PAM Ap-S proveniente del molusco Argopecten purpuratus. La estrategia de diseño de genes consideró el uso de codones predichos como útiles para expresión tanto en Echerichia coli como en Nicotiana tabacum. Los genes incluyeron señales de corte, purificación y detección de los péptidos. En E. coli, se encontró una dependencia de la temperatura para producir Pre-TEV/rApS, siendo 26°C el valor óptimo de cultivo con resultado productivo de 768 µg/mL. El uso de rApS purificado contra los fitopatógenos Alternaria sp., B. cinerea y F. oxysporum, mostró inhibición tanto del crecimiento de las hifas como de la formación de esporas en todos los hongos evaluados. La identidad de los PAMs recombinantes obtenidos en bacterias (Pre-TEV/rApS y rApS) fue corroborada por MALDI-TOF/TOF, confirmando la correcta lectura desde el gen diseñado. En N. tabacum se utilizó el promotor constitutivo 35SCaMV y se logró la generación de 44 líneas homocigotas candidatas. Extractos de proteínas totales desde estas plantas se utilizaron en ensayos de inhibición de crecimiento en placa Petri, permitiendo la identificación y caracterización de las mejores líneas transgénicas. Los mejores individuos generados mostraron inhibición del crecimiento radial en B. cinerea, F. oysporum y M. laxa. Además, las mejores líneas generadas fueron evaluadas a través Westernblot utilizando anticuerpos anti-TEV que ratificaron la presencia del péptido en los extractos utilizados. Los resultados obtenidos proyectan el uso de PAM desde bacteria o extractos directos de plantas para su utilización biotecnológica como biocontrolador amigable a la naturaleza.

    Seminarios

    Secuenciación del genoma del fitoplasmas 16SrIII-J

    Draft genome sequence of 16SrIII-J phytoplasma Alan Zamorano; Nicola Fiore Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile. E-Mail: agezac@u.uchile.cl

    El fitoplasma perteneciente al subgrupo ribosomal 16SrIII-J (X-disease group) se ha reportado en Chile y Sudamérica en diversos cultivos, tanto herbáceos como leñosos. Adicionalmente en Chile, Paratanus exitiosus y Bergallia Valdiviana, transmitieron exitosamente este fitoplasma a vinca. De una de estas vincas infectadas con el fitoplasma 16SrIII-J y de otra sana fueron sometidas a secuenciación masiva utilizando Illumina MiSeq. Las lecturas de la vinca positiva fueron ensambladas de novo utilizando VELVET. De un total de 263.786 contigs obtenidos, se filtró por profundidad, seleccionando todas aquellos contigs con una profundidad mayor que 10X. Los 1.550 contigs obtenidos fueron mapeados contra las secuencias de la vinca negativa, descartando todos aquellos que tenían identidad con una o más lecturas. 475 contigs resultantes fueron sometidos a un mapeo contra las lecturas obtenidas inicialmente en la vinca positiva. 137.260 lecturas fueron nuevamente ensambladas de novo en CLC genomics workbench v7, entregando 56 contigs (734.673 bp), cuyo contenido G+C es de 28,4%. Se determinaron marcos de lectura utilizando el programa predictivo RAST (http://rast.nmpdr.org). Se identificó la presencia del gen IdpA, específico del “X-disease group”, con un 85% de identidad nucleotídica con “PoiBI” phytoplasma y con “ICP” phytoplasma, ambos pertenecientes al X-disease group. No se identificaron genes que codifican para SAP11, SAP54, Amp and TENGU, proteínas efectoras secretados por translocasas que han sido directamente relacionados con los mecanismos de patogenicidad en otras especies de fitoplasmas, pero se identificaron 11 genes codificantes para proteínas hipotéticas y que llevaban el motivo SVM, péptido señal determinante de la secreción por translocasas. Este representa el primer trabajo de secuenciación del genoma del fitoplasmas 16SrIII-J. La información obtenida en este trabajo permitirá mejorar los protocolos de detección por PCR, además de establecer los efectores asociados a la patogenicidad de este patógeno.

    Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883

    Seminarios

    Dilucidando el perfil viral presente en papas nativas de Chiloé: antiguos y nuevos virus

    Deciphering the native potatoes virome: old and new players Elizabeth Peña1 ; Mónica Gutiérrez2 ; Alejandro Montecinos3; Rodrigo Gutiérrez3 ; Armelle Marais4 ; Thierry Candresse4 ; Marlene Rosales1 1 Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile 2 Laboratorio Regional Osorno, Servicio Agrícola y Ganadero 3 Facultad de Ciencias Biológicas, Pontificia Universidad Católica de Chile 4 Equipe de Virologie, INRA-Bordeaux. E-Mail: erpena@uc.cl

    Variedades nativas de papa (Solanum tuberosum L. ssp. tuberosum) originadas en los Archipiélagos de Chiloé y Los Chonos en el sur del país presentan gran diversidad en términos de forma, tamaño, color y sabor; resultando en un creciente interés por el cultivo de estas variedades. Sin embargo, estudios que incluyan identificación y caracterización de los agentes fitopatógenos que las afectan son limitados. Dentro de estos patógenos, destacan los virus, los cuales carecen de genes universales para ser utilizados como una herramienta de diagnóstico, limitando así el acceso a estudios de diversidad y composición viral en ambientes nativos. A través de una aproximación metagenómica seguida de secuenciación masiva y ensamble comparativo a genomas de referencia se encontró Potato mop-top virus (PMTV) infectando papas nativas provenientes del Archipiélago de Chiloé. Previo a este estudio, PMTV tenía carácter de virus cuarentenado, por lo que fue corroborado mediante RT-PCR y ELISA. Adicionalmente, junto a la presencia de virus como PVY, PVA, PVS, PVX y PLRV se encontró alta homología a diversas especies de Carlavirus que infectan plantas ornamentales, derivando más tarde al descubrimiento de una nueva especie del género. La secuencia completa de un aislado del virus fue obtenida a través de LD-PCR y 5’-RACE. Análisis de la secuencia genómica reveló que el nuevo virus presenta una organización genómica característica del género, con un genoma de ARN de simple hebra positivo de 8422 nt sin incluir la cola de Poli-A. Secuencias aminoacídicas derivadas de los genes de la CP y RdRp mostraron porcentajes de identidad de 32.3-73.9% y 49.2-57.7% respectivamente al compararlas con las descritas para otros Carlavirus, cumpliendo así con el criterio de demarcación de especies. Estos resultados proveen información importante para ser considerada en programas de monitoreo y manejo de patógenos que afectan el cultivo de papas en el país incluyendo la producción de tubérculo semilla de papa.

    Agradecimientos: Proyecto de Tesis en la Empresa PAI 7813110004. Gastos de Operación de CONICYT, folio 21120444.

    Seminarios

    Evaluación de agua activada con plasma y bacillus spp., contra bacterias fitopatógenas

    Evaluation of plasma activated water and bacillus spp., against bacterial pathogens Set Perez1 ; Enrico Biondi1 ; Matteo Gherardi3 ; Romolo Laurita3 ; Augusto Stancampiano3 ; Carla Lucchese1 ; Edith Ladurner4 ; Vittorio Colombo2,3; Assunta Bertaccini1 1Department of Agricultural Sciences (DipSA), Alma Mater Studiorum – University of Bologna 2 Industrial Research Centre for Advanced Mechanics and Materials (CIRI-MAM ), Alma Mater Studiorum – University of Bologna 3 Department of Industrial Engineering (DIN), Alma Mater Studiorum – University of Bologna 4 CBC (Europe) S.r.l., Cesena, Italy E-Mail: set.perezfuentealba2@unibo.it

    El control de enfermedades bacterianas, actualmente es limitada a productos a base de cobre, antibióticos, inductores de resistencia y agentes biocontroladores; no obstante, la profilaxis aún permanece como importante medida de control. En este estudio, fue evaluada la eficacia in vitro (método por difusión y dilución) del agua activada con plasma (PAW) contra dos bacterias fitopatógenas, Xanthomonas vesicatoria (Xv) y Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa). Para el propósito de obtener PAW, fue usada agua desionizada estéril y como electrodos de la fuente del plasma, papel aluminio cubierto por 1 mm de poliestireno como dieléctrico. El tratamiento consistió en diez minutos con voltaje de 19 kV y frecuencia de repetición de impulsos 1.000 Hz; esto ha inducido en PAW, presencia de nitratos, nitritos, peróxidos, y reducción del pH (ca. 3). El efecto de PAW, también fue evaluado in vivo sobre plantas de tomates inoculadas experimentalmente con Xv en condiciones de invernadero.

    Por otra parte, fueron realizadas pruebas de inhibición in vitro (método por difusión) usando Bacillus spp. cepas D747 y QST 713, confrontadas con Psa; esta habilidad, fue también evaluada en plantas de kiwi, inoculadas experimentalmente con Psa en condiciones controladas. Los resultados demostraron que PAW in vitro, aplicado 30 min posterior al tratamiento con plasma, no mostró eficacia directa contra Xv o Psa. Interesantemente, la severidad de la enfermedad provocada por Xv, fue significativamente menor en el tratamiento radical con PAW, evidenciando protección relativa de ca. 35%; no fue observado efecto fitotóxico. En experimentos in vitro, las dos cepas de Bacillus han inducido producción de compuestos antimicrobicos, inhibiendo el crecimiento de Psa. Asimismo, ambos tratamientos estuvieron en grado de reducir significativamente la severidad de la enfermedad causada por Psa.

    Estos interesantes resultados preliminares, son considerados promisorios especialmente en la agricultura sostenible, orientados a reducir el uso de metales pesados o antibióticos en el manejo de las enfermedades provocadas por bacterias fitopatógenas.

    Comunicaciones Orales

    Actualización sobre la situación del Control Oficial de Plum Pox Virus raza D en Chile, Servicio Agrícola y Ganadero

    Update status of the Official Control for Plum Pox Virus D strain in Chile, Servicio Agrícola y Ganadero María Eugenia Murillo; Sandra Bustos; Carolina San Martín Servicio Agrícola Ganadero (SAG), Subdepto. Sanidad Vegetal, Sección Vigilancia Fitosanitaria Agrícola E-Mail: mariaeugenia.murillo@sag.gob.cl

    El Plum Pox Virus raza D en Chile, se encuentra reglamentado desde el año 1994 mediante Resolución N° 794 y sus modificaciones, en las especies ciruelo (Prunus salicina, P. domestica), damasco (P. armeniaca), duraznero (P. persica), nectarino (P. persica var. nucipersica) y todas las especies referidas, que no incluyan almendros (P. dulcis), como también nemaguard y similares (P. persica x P. davidiana).

    Se evaluaron los resultados de muestreo de plantas madres desde el año 1995 a la fecha, período en que se analizó un total de 363.784 plantas declaradas como plantas madres. De acuerdo a los resultados de laboratorio, mediante las técnicas ELISA y PCR, 362.805 fueron negativas a PPV y sólo 979 positivas al virus, las cuales han sido destruidas en su totalidad, lo que corresponde a un total de 0,26% del total de plantas analizadas. Cabe señalar que el porcentaje de incidencia del virus en el año 1995 correspondió a un 1,63%, en tanto que en el año 2015, el porcentaje de incidencia fue de un 0,41 %, lo que demuestra una disminución del número de plantas madres positivas a PPV, logrando cumplir el objetivo del control oficial que es la contención del virus en las zonas donde se ha detectado los focos en las regiones Metropolitana, O´Higgins y Valparaíso.

    También cabe señalar, que la plaga se encuentra reglamentada a nivel de viveros de carozos mediante la Resolución N°981 de 2011 y que en forma permanente se realizan labores de fiscalización en los viveros como a los depósitos de plantas con el objetivo de determinar origen de material de propagación.

    Se destaca también que el estatus de PPV, como plaga cuarentenaria bajo control oficial, constituye una declaración adicional para muchos países donde se comercializa material de propagación y fruta de carozos, influyendo en la apertura o mantención de mercados.

    Comunicaciones Orales

    Virus y viroides presentes en manzano (Malus domestica Bork) en Chile

    Viruses and viroids infecting apple tree (Malus domestica Bork) in Chile Paloma Méndez; Nicolás Quiroga; Ana María Pino; Alan Zamorano; Nicola Fiore Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile E-Mail: paloma.mendezr@gmail.com

    Chile se ubica en el segundo lugar a nivel mundial en la exportación de manzanas. Debido a esto, el conocimiento del estado sanitario, particularmente de aquellas enfermedades que afectan la calidad de la fruta, es de alta importancia. Dentro de ellas destacan las enfermedades causadas por virus y viroides, las cuales están ampliamente distribuídas a nivel mundial. En Chile se realizó una prospección en el año 2002, logrando detectar Tomato ringspot virus (ToRSV), Apple mosaic virus (ApMV) y Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV). Actualmente, en otras regiones productoras en el mundo, se han reportado otros virus que infectan al manzano como Apple green crinkle virus (AGCV), Apple stem grooving virus (ASGV), Tulare apple mosaic virus (TAMV), Cherry rasp leaf virus (CRLV), además de los viroides Apple scar skin viroid (ASSVd), Apple fruit crinkle viroid (AFCVd), Apple dimple fruit viroid (ADFVd) y Pear blister canker viroid (PBCVd), de los cuales no existe información en el país. Durante el año 2014 se recolectaron 100 muestras en las principales regiones productoras del país: Metropolitana, O’Higgins y Maule. Se realizaron análisis por RTPCR con partidores disponibles en literatura. Se encontró una alta prevalencia de ApMV, ASGV y ASPV alcanzando un 41%, 47%, y 34%, respectivamente. ACLSV y PBCVd se encontraron respectivamente en un 15% y 3% de las muestras analizadas. Se alcanzó un 32% de infecciones dobles y un 12% de infecciones triples. Dos muestras estaban infectadas con cuatro patógenos. No se encontraron muestras positivas a ToRSV, en contraste con estudios previos. Para nuestro conocimiento, este es el primer reporte de ASGV y ASPV en Chile y el primer reporte de PBCVd en Sudamérica. Estos resultados proveen importante información para desarrollar protocolos más estrictos de control del material de propagación.

    Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

    Comunicaciones Orales

    Caracterización de Apple mosaic virus, ApMV; Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV y Tomato ringspot virus, ToRSV en huertos de manzano de la Región del Maule

    Characterization of Apple mosaic virus, ApMV, Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV and Tomato ringspot virus, ToRSV in apple orchards in the Maule Region Fernanda Núñez1 ; Claudio Sandoval1 ; Valentina Mujica2 ; Mauricio Lolas1 1 Laboratoro de Fitopatología, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile 2 INIA, Las Brujas, Uruguay E-Mail: fnunez@utalca.cl

    El manzano es uno de los principales frutales a nivel mundial y en Chile ocupa el segundo lugar en cuanto a superficie plantada, siendo la Región del Maule la que concentra la mayor superficie. Dentro de los factores productivos que afectan la calidad de la fruta están los diferentes patógenos que atacan este cultivo, constituyendo los virus dentro de éstos, un factor de importancia. Las virosis afectan tanto la calidad de las plantas en vivero, como también su crecimiento, producción, calidad de fruta y la vida de postcosecha. En la actualidad se desconoce la importancia de Apple mosaic virus (ApMV), Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV) y Tomato ringspot virus (ToRSV) en huertos comerciales de manzano. Con este propósito se realizó una prospección y caracterización de ApMV, ACLSV y ToRSV en huertos comerciales de manzano de la Región del Maule. Las muestras colectadas (151) se analizaron a través de DAS-ELISA y RT-PCR. Con la técnica DASELISA 1,3% resultó positivo a ApMV, un 2,0% para ACLSV y negativos para ToRSV. Por otra parte, con la técnica Molecular RT-PCR un 6,0% resultó positivo para ApMV, un 40,4% para ACLSV y un 7,2% para ToRSV. Las secuencias y el análisis filogenético de aislados de ApMV y ACLSV, indican que proteína de la cápside del ApMV encontradas en la Región del Maule, éstas se distancian de las secuencias depositadas en el GenBank. Situación similar se obtiene con el árbol filogenético de ACLSV, donde las secuencias de los aislados también se distancian de los depósitos en GenBank. Ésto podría indicar que las secuencias de los aislados presentes en la Región del Maule muestras diferencias en cuanto a distancia evolutiva.

    Comunicaciones Orales

    Detección y caracterización molecular de fitoplasmas asociados al peral en Chile

    Detection and molecular characterization of phytoplasmas associated to pear trees (Pyrus communis L.) in Chile Rosany Facundo; Nicolás Quiroga; Paloma Méndez; Alan Zamorano; Nicola Fiore Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile E-Mail: roxyannaa@gmail.com

    Las enfermedades causadas por fitoplasmas generan grandes pérdidas económicas en cultivos en el mundo. En el peral se ha reportado una severa enfermedad, el decaimiento del peral, asociada a estos patógenos. En Chile, a pesar de la importancia económica que ha ido adquiriendo este cultivo, no se han realizado estudios sobre la presencia de estos patógenos. Se colectaron muestras con síntomas asociados a enfermedades causadas por fitoplasmas, en las principales zonas productoras de peral en Chile. Se realizó la detección y caracterización del patógeno mediante reacción en cadena de la polimerasa anidada (PCR-anidada) orientada a los genes tuf y 16Sr RNA. Los amplicones obtenidos fueron clonados y cinco colonias fueron sometidas a secuenciación de ADN. Con las secuencias se realizó un análisis bioinformático usando alineamientos, filogenia y RFLP in silico. De las muestras colectadas, hasta el momento se ha detectado la presencia de fitoplasmas en dos muestras procedentes de la región del Maule: un peral variedad D’Anjou que presentaba bajo vigor, necrosis en el floema y enrojecimiento de hojas y un peral variedad Abate Fetel que presentaba necrosis en floema, enrojecimiento de hojas y defoliación temprana. En ambas muestras se ha detectado la presencia del fitoplasma 16SrIII-J, ampliamente distribuido en Chile y asociado a cultivos herbáceos y leñosos. En el huerto de la variedad D’Anjou se había detectado y caracterizado el mismo fitoplasma también en Galega officinalis L., una maleza habitualmente presente en la zona central de Chile. Este trabajo representa la primera detección de fitoplasmas en pomáceas en Chile.

    Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

    Comunicaciones Orales

    Detección y caracterización molecular de fitoplasmas asociados a frutales de carozo en Chile

    Detection and molecular characterization of phytoplasmas infecting stone-fruit trees in Chile Claudia Rebolledo; Nicolás Quiroga; Rosany Facundo; Alan Zamorano; Nicola Fiore Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile. E-Mail: claurebo@gmail.com

    En Chile el mayor volumen de frutos y principal retorno económico de las exportaciones agrícolas corresponde a los generados por los frutales de carozo. Entre las enfermedades que afectan a estas especies vegetales a nivel mundial, los fitoplasmas han tomado relevancia, principalmente debido a la disminución tanto de la producción como de la calidad de los frutos. El control de las fitoplasmosis es prevalentemente de tipo preventivo, por lo tanto es necesario contar con herramientas de detección rápidas y sensibles. Actualmente en Chile se dispone de informaciones acerca de la presencia del fitoplasma 16SrIII-J en cerezo y de 'Candidatus Phytoplasma solani' (16SrXII-A) en durazno. Estas han sido dos detecciones puntuales y, no disponiendo de datos prospectivos, se procedió a realizar un muestreo en las principales regiones productoras de frutales de carozo. Se colectaron muestras con síntomas que, de acuerdo a la literatura, podrían estar asociados a la presencia de fitoplasmas. Para la detección y caracterización de los fitoplasmas se amplificaron, a través de PCR anidada (“nested PCR”), dos regiones del genoma correspondientes a los genes tuf y 16S rRNA. Cada producto de amplificación fue clonado y cinco colonias fueron secuenciadas para discriminar posibles infecciones múltiples. La caracterización molecular se completó con un análisis bioinformático que incluye alineamientos, filogenia y RFLP virtual (in silico). Una muestra de durazno de la región de Valparaíso que presentaba decaimiento severo, hojas encarrujadas y amarillas y una muestra de cerezo colectada en la región del Maule que presentaba necrosis de floema, brazos muertos y decaimiento generalizado, fueron detectadas positivas a fitoplasma por ambos genes. El análisis bioinformático permitió determinar que ambos aislados pertenecen al subgrupo ribosomal 16SrIII-J (perteneciente al “X-disease group”). Este fitoplasma se encuentra ampliamente distribuido en Chile, tanto en cultivos herbáceos como leñosos, incluyendo el cerezo. Esta corresponde a la primera detección del fitoplasmas 16SrIII-J en duraznero en Chile.

    Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

    Comunicaciones Orales

    Detección y caracterización de los viroides que afectan a la vid en Chile

    Detection and characterization of Chilean isolates of grapevine viroids Nicola Fiore; Ximena González; Nicolás Quiroga; Alan Zamorano Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas, Departamento de Sanidad Vegetal; Santiago, Chile. E-Mail: nfiore@uchile.cl

    Los viroides más frecuentes en vid a nivel mundial son: Hop stunt viroid (HSVd), Australian grapevine viroid (AGVd), Citrus exocortis viroid (CEVd), Grapevine yellow speckle viroid 1 y 2 (GYSVd-1, 2). Con el fin de detectar y caracterizar los viroides de la vid presentes en Chile, se colectaron 110 muestras desde Atacama hasta el Maule. El RNA se extrajo utilizando el método de captura con sílice. La detección se realizó con RT-PCR utilizando primer específicos para cada viroide. Los productos de amplificación se purificaron y clonaron. Los análisis bioinformáticos se han realizado utilizando MEGA6.0. HSVd ha sido detectado en 91,0% de las muestras analizadas, GYSVd-1 en 20,0%, GYSVd-2 en 10,9%, AGVd en 9,1% y CEVd en ninguna. HSVd es un viroide polífago que parece haber coevolucionado con la vid, por lo tanto es común encontrar altos porcentajes de infección). El análisis filogenético indica que los aislados chilenos se distribuyen en los grupos P-H/Cit3 y Hop, ambos constituidos por aislados de HSVd que infectan a la vid. Se observa una alta asociación entre la variedad Syrah y GYSVd-1, que ha sido detectado en 10 muestras sobre 15, todas desde plantas con “Syrah Decline”. Los aislados chilenos de GYSVd-1 pertenecen a las variantes 1 (asintomática) y 3 (sintomática). Siete de los nueve aislados de GYSVd-1 secuenciados corresponden a la variante 3, pero solo uno de ellos manifestó el síntomas del “bandeado de nervaduras” de hojas en una planta infectada también con Grapevine fanleaf virus. GYSVd-2 y AGVd resultaron más frecuentes en uva de mesa. Todos los aislados chilenos de GYSVd-2 se agrupan entre sí y con aislados chinos y australianos. El análisis filogenético realizado para GYSVd-1, GYSVd-2 y AGVd, en contraste con lo afirmado en anteriores trabajos, no indica asociación entre el origen geográfico y la agrupación de las diferentes variantes. Esta es la primera detección y caracterización de viroides de la vid en Sudamérica.

    Agradecimientos: CONICYT proyecto Nº 21090139, Ministerio de Educación, Gobierno de Chile.

    Comunicaciones Orales

    Nuevo virus afecta el cultivo de la lechuga (Lactuca sativa L.) en las regiones de Coquimbo y Metropolitana

    A new virus disease affecting lettuce (Lactuca sativa L.) crops in the two regions of Chile Mónica Madariaga; Paulina Sepúlveda; Isabel Ramírez; Roxana Mora; Luís Felipe Muñoz Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina E-Mail: mmadariaga@inia.cl

    La lechuga es una hortaliza de alto consumo cuyo cultivo se focaliza en las Regiones Metropolitana, Coquimbo y Valparaíso. En cultivos de verano e invierno en las temporadas 2013 al 2015 en el sector Pan de Azúcar de la Región de Coquimbo, se observaron en plantas de lechuga del tipo costina, escarola y milanesa, síntomas de manchas necróticas en el borde y centro de la hoja que llevaban finalmente a la muerte de planta. Impatiens necrotic spot virus (INSV) fue identificado como el agente causal de esta sintomatología mediante la aplicación de técnicas de detección serológicas y moleculares. Considerando, la implicancia económica que tiene INSV en el cultivo de esta hortaliza, se planteó como objetivo para este trabajo determinar la presencia del virus en otras regiones productoras de lechuga. Se visitaron cultivos en diversas comunas de la Región Metropolitana y Valparaíso. Sólo se observó sintomatología similar a la descrita anteriormente en la comuna de Melipilla en lechugas tipo milanesa provenientes de plantaciones de invierno. El porcentaje del cultivo afectado con esta sintomatología fue de alrededor del 50% en promedio. Se tomaron muestras con síntomas y se realizó un RT-PCR con partidores específicos para INSV (5´-GATCTGTCCTGGGATTGTTC-3'/5'-GTCTCCTTCTGGTTCTATAATCAT-3'). Los resultados mostraron una banda esperada de 459 pb. El producto de PCR obtenido fue clonado, purificado y posteriormente secuenciado en Macrogen. La secuencia obtenida fue comparada con aquellas disponibles en la base de dato NCBI, obteniéndose una identidad de 99% con la región M del genoma de INSV. La identidad del virus fue corroborada mediante la prueba serológica ELISA con anticuerpos comerciales (Bioreba) específicos para INSV.

    Comunicaciones Orales

    Caracterización molecular de un fitoplasma asociado a filodia y escoba de brujas de frutilla (Fragaria x ananasa)

    Molecular characterization of a phytoplasma associated to phyllody and witches’broom in strawberry (Fragaria x ananasa) Nicolás Quiroga1 ; Marcelo Cabrera2 ; Mariella Valdera2 ; Eugenio Rodríguez3 ; Rosa Coronado3 ; Alan Zamorano1 ; Nicola Fiore1 1Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile 2 Servicio Agrícola y Ganadero, Laboratorios y Estaciones Cuarentenarias de Lo Aguirre, Santiago, Chile 3 Servicio Agrícola y Ganadero, Oficina San Antonio, San Antonio, Chile E-Mail: nicolasquirogabarrera@gmail.com

    Para el cultivo de la frutilla en Chile actualmente se ocupan 1.272 ha, siendo el consumo local y la exportación en congelado el principal destino de la producción. El volumen exportado alcanza las 15.333 toneladas y se estima que se mantendrá, ya que el consumo de frutillas en los principales países importadores (Japón, Estados unidos, China y Canadá) está creciendo. Actualmente en Chile no se dispone de informaciones acerca de la presencia de fitoplasmas en frutilla. Durante el verano del 2015 en la comuna de Santo Domingo, región de Valparaíso, se colectaron plantas de frutillas de la variedad Camarosa (Fragaria x Ananassa Duch.) con síntomas de filodia y proliferación de brotes. Para la detección y caracterización de los fitoplasmas se amplificaron, a través de PCR anidada (“nested PCR”), dos regiones del genoma correspondientes a los genes tuf y 16Sr RNA. Cada producto de amplificación fue clonado utilizando el vector pGEM-T. Cinco colonias fueron secuenciadas para discriminar posibles infecciones múltiples. La caracterización molecular se completó con un análisis bioinformático que incluye alineamientos, filogenia y RFLP virtual (in silico). Tres muestras fueron detectadas positivas a fitoplasma por ambos genes. El análisis bioinformático permitió determinar que estos aislados pertenecen al subgrupo ribosomal 16SrXIII-F, con un 99,8% de identidad nucleotídica con un aislado reportado en Argentina causando enrojecimiento de hojas de la frutilla (Accession number KJ921643). Esta es la primera indicación de un fitoplasma perteneciente al grupo ribosomal 16SrXIII afectando cultivos en Chile, así como también el primer fitoplasma reportado en el cultivo de frutilla en el país.

    Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

    Comunicaciones Orales

    Prevalencia de dos Begomovirus, TYVSV y ToLDeV, en cultivo de Tomate en la Región de Arica y Parinacota

    Prevalence of two Begomovirus TYVSV and ToLDeV in Tomato crops in Arica and Parinacota Region Claudia Rojas1 ; Jesús Navas2 ; Katherine Plaza1 ; Paulina Sepúlveda3 ; Marlene Rosales1 1 Pontificia Universidad Católica de Chile 2 Instituto de Hortofruticultura Subtropical y Mediterránea La Mayora, España 3 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación La Platina E-Mail: carojas12@uc.cl

    El valle de Azapa es el principal abastecedor de tomate de consumo fresco para la zona central de Chile durante los meses invernales. El año 2007 las plantaciones de tomate se vieron afectadas por enfermedades de origen viral ocasionando pérdidas entre un 30 a 70% de rendimiento. Análisis mediante PCR durante el período 2009-2010 arrojó que los principales virus presentes correspondieron a PepMV, Potivirus y Begomovirus presentando una prevalencia de 26,9%, 26,9 y 57% respectivamente. Este trabajo tiene como objetivo determinar la prevalencia de los begomovirus Tomato yellow vein streak virus (TYVSV) y Tomato leaf deformation virus (ToLDeV) en cultivos de tomate, malezas y plantas nativas presentes en los valles de la región de Arica y Parinacota. Para ello se colectaron 641 muestras de tejido vegetal de distintas plantaciones de tomate en la región, las cuales fueron analizadas mediante hibridación molecular. Del total de muestras analizadas, el 37% resultaron positivas a TYVSV mientras que un 11% fueron positivas para ToLDeV. Además el 8,3% presentó infección mixta con ambos begomovirus. Este trabajo da cuenta de un segundo begomovirus (ToLDeV) afectando los cultivos de tomate en la región de Arica y Parinacota, presentando una menor prevalencia que el begomovirus previamente descrito (TYVSV).

    Agradecimientos: Proyecto Tesis de Doctorado en la Industria Folio N° 7813110003. “Caracterización de agentes virales afectando cultivos de tomate en la región de Arica y Parinacota”.

    Comunicaciones Orales

    Prevalencia de virus en lilium entre Regiones de Valparaíso a Los Lagos en Chile

    Prevalence of lily viruses from the Region of Valparaíso to Los Lagos in Chile Estefanía Farías; Marcela Paz Muñoz; Natalia Vega; Marlene Rosales Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile E-Mail: egfarias@uc.cl

    La producción de lilium (Lilium sp.) representa una actividad comercial importante para Chile, país que se posicionó en el 2013 como cuarto exportador mundial de bulbos de flor. El objetivo de este trabajo fue actualizar la información sobre la situación fitosanitaria de este cultivo a nivel nacional y a nivel de mercado. Durante el año 2014 se colectaron bulbos de lilium de las comunas de Limache, Hijuelas y Nogales (Región de Valparaíso), San Vicente y Doñihue (Región del Libertador Bernardo O'Higgins), San Rafael (Región del Maule), Los Ángeles (Región de Bío-Bío), Rio Bueno (Región de Los Ríos) y Osorno, Purranque y Puyehue (Región de Los Lagos) en Chile. Los bulbos fueron seleccionados de forma no dirigida desde el campo, para el caso de las flores de corte, o desde las líneas de procesamiento cuando se trataba de bulbos de exportación; de esta forma se dispuso de material destinado para ambos mercados. Durante el año 2015 se determinó mediante la técnica RT-PCR la prevalencia de cinco virus: Alfalfa Mosaic Virus (AMV), Lily Symptomless Virus (LSV), Lily Mottle Virus (LMoV), Lily Virus X (LVX) y Tobacco Rattle Virus (TRV), en un total de 502 muestras. Del total de muestras analizadas, 325 fueron positivas a uno o más de los virus mencionados, lo que corresponde a un 64,7% de muestras positivas. LMoV, LSV y LVX fueron los virus más prevalentes, presentándose en un 27,5; 22,5 y 17,5% de los casos, respectivamente. En cuanto al análisis por mercado, un 72,6% de las muestras resultó positiva para uno o más virus en el mercado de flores y un 58,9% en el mercado de bulbos de exportación. Los resultados indican que LMoV es el virus de mayor prevalencia en el territorio nacional y que el mercado de flores de corte presenta un mayor número de muestras positivas con respecto al mercado de bulbos de exportación.

    Agradecimientos: Proyecto FONDEF IDeA CA13I10208.

    Comunicaciones Orales

    Detección molecular y serológica de Lily symptomless virus en bulbos de lilium

    Molecular and serological detection of Lily symptomless virus from lily bulbs Araceli Vidal; Estefanía Farías, Marcela Paz Muñoz; Marlene Rosales Laboratorio de Fitopatología Molecular. Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal. Pontificia Universidad Católica de Chile E-Mail: araceli.vidal.a@gmail.com

    El lilium es una planta bulbosa muy relevante debido a su venta como planta de maceta, flor de corte y exportación de bulbos. A nivel internacional, Chile ocupa el cuarto lugar entre los mayores exportadores de bulbos de flores y es el primero en Sudamérica. Para la exportación de bulbos debe certificarse que éstos se encuentran libres de patógenos, y en el caso de los virus, éstos a menudo son difíciles de identificar. Actualmente, la técnica de referencia para la certificación de virus en bulbos de lilium en Chile es la prueba de ELISA. Aunque existen antecedentes que indican que la detección por medio de la transcripción reversa acoplado al PCR (RT- PCR) es más sensible para la detección de virus vegetales respecto del ELISA, la reacción de PCR puede ser inhibida debido a la presencia de polisacáridos o fenoles presentes en el RNA extraído desde el bulbo de lilium. Por esta razón, el objetivo de este trabajo fue evaluar la detección de Lily symptomless virus (LSV) por RT-PCR, dado que LSV es el virus más prevalente a nivel mundial en este cultivo ornamental. Para esto, se utilizó un kit comercial para realizar la extracción de ácidos ribonucleicos (ARN) desde escamas internas y externas de bulbo, material que fue posteriormente utilizando con éxito en la detección del virus mediante RT-PCR. Los resultados muestran que la eficiencia de la extracción de RNA es mayor en escamas internas del bulbo. No obstante, se logró detectar LSV mediante RT-PCR en ambos tipos de escamas, mostrando una distribución irregular del virus en estos tejidos. Adicionalmente se comparó los resultados de la detección de LSV en escamas de bulbos de lilium mediante las técnicas de RT-PCR y ELISA.

    Agradecimientos: Proyecto Fondef IDeA CA13I10208.

    Comunicaciones Orales

    Obtención de bulbillos de lilium libres de virus LSV y LMoV, mediante cultivo de meristemas y termoterapia en el cultivar “Manissa”

    Production of lily virus-free bulblets using meristem culture and thermoterapy in cv. “Manissa” Carolina Fernández; Ann Scott; Marlene Rosales; Marlene Gebauer Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile E-Mail: crfernan@uc.cl

    Chile es el mayor exportador de Sudamérica de bulbos de flores en contra-estación para el hemisferio norte, siendo el cuarto exportador a nivel mundial. Lilium es la principal especie exportada como bulbo de flor en reposo vegetativo, representando el 85% del total de las exportaciones. La calidad de los bulbos con los que se trabaja, es de gran importancia debido a que el mercado tiene estándares internacionales de calidad, que busca productos libre de plagas y/o enfermedades como las causadas por virus.

    Cultivares comerciales de lilium han mostrado síntomas de infección por virus luego de años de reproducción asexual y cultivo en el campo, disminuyendo su productividad y calidad. La utilización de técnicas de saneamiento como cultivo de meristemas, termoterapia, quimioterapia o una combinación de ellas, ha mostrado buenos resultados en la obtención de material limpio para propagar.

    Con el fin de obtener plantas madres de calidad y que estén libres de enfermedades virales se estableció un sistema de saneamiento vegetal utilizando bulbos infectados del cultivar “Manissa” (OT), producidos ampliamente en nuestro país. Se realizaron diferentes ensayos utilizando microbulbilllos establecidos in vitro para aislar los meristemas. Se evaluó la sobrevivencia y limpieza de los meristemas en relación al tamaño. Se logró sanear plántulas infectadas con Lily Symptomless Virus (LSV), Lily Mottle Virus (LMoV) o con ambos. También se está evaluando la termoterapia como técnica de saneamiento, mediante parámetros como temperatura, tamaño del explante y tiempo crítico para la sobrevivencia de microbulbillos, de esta forma se podrá facilitar la eliminación de diferentes virus encontrados en la prospección realizada en Chile.

    Agradecimientos: Proyecto Fondef IDEA CA13I10208.

    Comunicaciones Orales

    Detección de PVY y PLRV en Myzus persicae para determinar la infectividad en la dinámica de poblaciones de áfidos vectores

    PVY and PLRV detection in Myzus persicae to determine infectivity in the aphid population dynamic Camila Sandoval1 ; Ivette Acuña1 ; Rodrigo Bravo1 ; Sandra Mancilla1; Ernesto Cisternas1 ; Marcelo Villagra1 ; Marlene Rosales2 1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA-Remehue 2 Pontifica Universidad Católica de Chile, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Departamento de Ciencias Vegetales. E-Mail: camila.sandoval@inia.cl

    En las últimas temporadas, se ha observado un aumento de las enfermedades virales que afectan al cultivo de papa en la zona sur de Chile, ocasionando pérdidas importantes en el rendimiento y calidad del producto final, además de un aumento en el rechazo de semilleros para certificación. Dentro de los virus de importancia se encuentra el virus del enrollamiento de la hoja (PLRV) y virus del mosaico severo (PVY), los cuales son diseminados mediante áfidos vectores de manera persistente y no persistente, respectivamente. Para poder controlar las poblaciones de insectos, es fundamental efectuar un monitoreo del vuelo de áfidos y conocer el período infectivo de estos. De esta manera, el objetivo de este trabajo fue implementar una técnica de detección de PLRV y PVY basada en RT-PCR utilizando como vector a Myzus persicae. Se realizó un ensayo de sensibilidad de detección, donde se depositaron M. persicae (libres de virus) sobre hojas infectadas con PVY y PLRV. Posteriormente se extrajo ARN total desde 1, 2, 4 y 6 áfidos siendo evaluadas mediante RTPCR utilizando partidores específicos para cada virus junto a un control interno. Como resultado, se obtuvo la detección de ambos virus a partir de 1 individuo. Esta metodología será usada para obtener información de la interacción virus –vector y el momento en que los vectores comienzan a ser infectivos en las curvas de vuelo, ayudando al desarrollo e implementación del Sistema de Alerta de vuelo de áfidos (http://manualinia.papachile.cl), que determina los momentos críticos para la presencia de áfidos vectores de virus, actualmente basado en información de capturas en trampas y datos meteorológicos.

    Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la Innovación Agraria FIA a través del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

    Comunicaciones Orales

    Caracterización biológica y molecular de aislados chilenos del Virus S de la papa (PVS) provenientes de las regiones de Los Ríos y Los Lagos

    Biological and molecular characterization of chilean isolates of Potato virus S (PVS) from Los Rios and Los Lagos regions Ester Vargas1 ; Mónica Gutiérrez2 ; Ivette Acuña3 ; Marlene Rosales1 1 Pontificia Universidad Católica de Chile, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Departamento de Ciencias Vegetales 2 Servicio Agrícola y Ganadero (SAG), Laboratorio Regional Osorno 3 Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), Centro Regional de Investigación Remehue E-Mail: ester.vargas.gonzalez@gmail.com

    PVS pertenece al género Carlavirus y posee como material genético un RNA de hebra simple. En base a la reacción local o sistémica sobre plantas indicadoras de Chenopodium quinoa, se han descrito dos razas de este virus: la Ordinaria (PVSO ) y la Andina (PVSA ). PVSA induce síntomas más severos y es más eficientemente transmitido por los áfidos que las cepas de PVSO . Prospecciones realizadas en el sur de Chile revelan una prevalencia de un 66% para este virus en cultivos de papa destinados a consumo y producción de tubérculo semilla. El objetivo de este estudio fue caracterizar genética y biológicamente las razas de PVS provenientes de las regiones de Los Ríos y Los Lagos. Para ello, se muestrearon plantas de papa con y sin síntomas de virosis y en ellas se analizó la presencia de PVS mediante un test de ELISA (Bioreba). Luego, para un total de 28 aislados se amplificaron y secuenciaron los genes que codifican para la proteína de cubierta (CP) y la proteína de 11 kDa (11K). Las secuencias obtenidas fueron analizadas mediante programas computacionales (Geneiuos, Clustal Omega y DnaSP) y comparadas con otras secuencias de PVS del GenBank. Los resultados revelaron que dos de los aislados chilenos estudiados agruparon con PVSA , mientras el resto se clasificó como PVSO . Los valores de diversidad nucleotídica (π) y porcentaje de identidad de secuencia para cada raza sugieren que las mayores variaciones se encuentran en el grupo PVSA . Los dos aislados PVSA tienen su origen en el Archipiélago de Chiloé, pudiendo existir una relación genotipo-geográfica para este virus. Se destinó un aislado de cada raza para realizar una caracterización biológica, a través de la inoculación mecánica de plantas indicadoras de C. quinoa y N. tabacum. Ambos aislados desarrollaron infección sistémica, resultado esperado para la raza andina, PVSA , pero no así para la raza ordinaria, PVSO , sugiriendo la posibilidad de una nueva variante citada en trabajos anteriores, la raza PVSO-CS (CS: Chenopodium sistémico).

    Agradecimientos: Proyecto FIA PYT-2011-0065 “Desarrollo de una estrategia de alerta sanitaria virus-vector para el cultivo de la papa en la zona sur”. 2011.

    Comunicaciones Orales

    Detección rápida de Olpidium spp. en muestras de suelos y raíces

    Rapid detection of Olpidium spp. in soil and root samples Wendy Wong1 ; Marlene Rosales2 1Universidad Iberoamericana de Ciencias y Tecnología, Facultad de Recursos Naturales y Ciencias Silvoagropecuarias 2 Pontificia Universidad Católica de Chile, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal. E-Mail: wendy.wong@uibero.cl

    El género Olpidium incluye especies que son transmisoras de virus de plantas. Estos hongos son habitantes naturales del suelo con capacidad para sobrevivir en éste por más de 15 años debido a las esporas de resistencia que poseen. Además, son considerados como parásitos obligados, por lo que su detección en suelo, tradicionalmente, se realiza usando plantas trampa, cuyas raíces son observadas al microscopio buscando las esporas de resistencia. En Chile se ha reportado la presencia de O. virulentus, transmitiendo los virus asociados a la enfermedad de la Vena ancha de las lechugas (MiLBVV) y LBVaV y O. bornovanus, transmitiendo el Virus de las manchas necróticas del melón (MNSV). Debido a la dificultad y al tiempo que demora la detección del hongo mediante el análisis morfológico, los objetivos de este trabajo fueron implementar la técnica PCR para la detección e identificación en suelos y raíces de estas dos especies de hongos. Se obtuvieron 23 muestras de suelo en predios agrícolas, que fueron procesadas tanto por análisis morfológico como por PCR, para este último se utilizaron partidores específicos basados en las secuencias del rDNAr-ITS. Mediante el análisis morfológico solo dos muestras resultaron positivas a O. bornovanus y cuatro a O. virulentus. Por el contrario el análisis molecular detectó 10 muestras positivas a O. bornovanus y 13 muestras positivas a O. virulentus. Mientras que las esporas de resistencia pudieron ser observadas a los 21 días de la siembra de las semillas, el análisis molecular fue efectivo ya a los 10 días. Por lo que el análisis por PCR permitió acelerar la identificación del hongo comparada con la identificación morfológica. Además, se debe destacar que este trabajo da cuenta por primera vez de la detección de Olpidium spp. Directamente de suelo.

    Comunicaciones Orales

    Ralstonia solanacearum Bv.2 agente causal de marchitez bacteriana de la papa en Araucanía (2013-2015)

    Ralstonia solanacearum Bv.2 causal agent of bacterial wilt of potato in the Araucania Region (2013- 2015) Claudio Lillo1 ; Silvia Moreira1 ; María Calfio1 ; Mónica Salazar1 ; Ernesto Vega2 ; Carolina Ureta2 ; Isaul Saavedra3 ; Pablo Sepúlveda3 ; Carmen Gloria Velasquez3 ; Mauricio Seguel4 1 Laboratorio Fitopatología, 2 Laboratorio de Bacteriología Agrícola Lo Aguirre, 3 Protección Agrícola y Forestal, 4Recursos Naturales Renovables Servicio Agrícola y Ganadero, Región de La Araucanía E-Mail: claudio.lillo@sag.gob.cl

    La marchitez bacteriana de la papa causada por Ralstonia solanacearum, es una de las principales enfermedades bacterianas en el mundo, estatus de cuarentenaria presente en Chile para el biovar 2. El año 2013 en actividades de vigilancia fitosanitaria se diagnosticó su presencia observándose en terreno plantas marchitas y tubérculos presentando pequeñas fisuras y necrosis asociada a yemas y estolón, al corte, los tubérculos presentan color pardo en anillo vascular, necrosis y exudados bacterianos característicos. En la Región de la Araucanía se destinan 14.459 ha para cultivar papas y se ha cuantificado una pérdida de rendimiento por la enfermedad de 72%. El objetivo del presente trabajo fue realizar un diagnóstico de incidencia de Ralstonia solanacearum Bv.2 (R.s.) para la Región de La Araucanía, en un total de 3.982 muestras analizadas, utilizando la prueba DAS-ELISA y su confirmación por la técnica de PCR entre los años 2013 y 2015. Los resultados para el período analizado señalaron una incidencia de 6%; 2,5% y 2,2%; para los años 2013, 2014 y 2015 respectivamente. Al mes de Agosto 2015, la Región contempla 78 focos de marchitez bacteriana en cuarentena por tres años, la superficie afectada es de 574,4 ha equivalente a 3,97% de la superficie regional con papa. El año 2016 se iniciará el análisis por PCR en muestras compuestas de suelo para el levantamiento de cuarentena, personal SAG trabaja activamente en la detección oportuna, informar y sensibilizar a los agricultores de esta grave amenaza para contener y erradicar la enfermedad de la Región de La Araucanía.

    Comunicaciones Orales

    Primer reporte de Sphaerulina musiva (Peck) Quaedvlieg, Verkley & Crous causando manchas foliares en álamo en Chile

    First report of Sphaerulina musiva (Peck) Quaedvlieg, Verkley & Crous causing leaf spot on poplar trees in Chile Alex Opazo1 ; Mario Zapata2 1División Protección Agrícola y Forestal, Servicio Agrícola y Ganadero 2 Laboratorio Regional Chillán, Servicio Agrícola y Ganadero E-Mail: alex.opazo@sag.gob.cl

    En prospecciones forestales de álamo (Populus sp.), realizadas a fines del 2014 por parte del Servicio Agrícola y Ganadero (SAG) en la comuna de San Carlos (Región del Biobío), se observaron manchas foliares, desde las cuales se colectaron conidios filiformes con 1 a 4 septos, características del género Septoria. A partir de conidios germinados individualmente, se establecieron cultivos puros para la caracterización morfológica y molecular de los aislados. Para los estudios moleculares se requirió la secuenciación de la región ITS del rDNA, y parte de los genes TEF (factor de elongación), ß-Tubulina 2 y la subunidad mayor del ribosoma (LSU-rDNA). Las secuencias obtenidas fueron alineadas junto a otros aislados CBS de referencia de Septoria musiva, S. populi y S. populicola disponibles en Genbank. El análisis de las relaciones filogenéticas fue inferido con criterios de máxima parsimonia (MP) con búsqueda heurística y TBR (treebisectionreconnection), con los 4 loci concatenados. Finalmente, se realizó un test de delimitación de especies usando el modelo Poisson Tree Processes, donde al árbol MP se le adicionaron valores de soporte bayesianos (BS) para prueba de hipótesis.

    El análisis filogenético combinado mostró un claro agrupamiento del aislado en estudio con S. musiva. El test de delimitación de especies confirmó la inclusión del aislado en estudio dentro del clado de S. musiva. Nuevas identificaciones de S. musiva, basados en su morfología, han sido verificados usando PCR con partidores específicos, y controles positivos derivados de la primera identificación.

    Sphaerulina musiva (=Mycosphaerella populorum; anamorfo: Septoria musiva) provoca cancros y necrosis foliar en especies del género Populus, limitando el cultivo de híbridos o variedades más susceptibles. Es originaria del hemisferio norte (Canadá, Estados Unidos) y se ha introducido en México, Brasil y Argentina. De acuerdo a nuestro conocimiento, este corresponde al primer reporte de Sphaerulina musiva en Chile, siendo detectada, en plantaciones, cortinas cortaviento y árboles aislados de Populus spp. en las Regiones del Biobío y Maule.

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    Patogenicidad, agresividad y diversidad genética de especies de Gaeumannomyces graminis y Phaeosphaeria afectando trigo en Chile

    Pathogenicity, aggressiveness and genetic diversity of Gaeumannomyces graminis and Phaeosphaeria species affecting wheat crops in Southern Chile Ernesto Moya-Elizondo1 ; Nolberto Arismendi1 ; Braulio Ruiz1 ; María Paz Castro2 ; Herman Doussoulin2 ; Ricardo Madariaga3 1Departamento de Producción Vegetal, Universidad de Concepción, Chillan, Chile 2 Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile 3 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Quilamapu, Chillán E-Mail: emoya@udec.cl

    Diferentes hongos colonizan raíces y corona de trigo causando pérdidas en su producción. Especies del complejo Gaeumannomyces graminis causan severas pérdidas en este cultivo; sin embargo, existen pocos antecedentes en Chile sobre su variabilidad genética, patogenicidad y agresividad. Phaeosphaeria pontiformis es comúnmente aislado desde tallos de trigo, pero no existe claridad sobre su patogenicidad y agresividad en este cultivo. Esta investigación evaluó la existencia de diferentes grupos genéticos en aislados chilenos de G. graminis var. tritici (Ggt), la especificidad de los partidores asociados a esta determinación, y la patogenicidad y agresividad de diferentes aislados de Ggt, G. graminis var. avenae (Gga) and P. pontiformis. La identidad de cuarenta aislados de estos hongos obtenidos entre la Región del Biobío y Los Lagos fue confirmada mediante caracterización molecular de genes ribosomales y regiones ITS, mientras que grupos genéticos de Ggt fueron determinados usando partidores específicos. Discrepancia entre grupos genéticos fue determinada mediantes análisis de bandas polimórficas obtenidas con RAPDPCR. Patogenicidad y severidad de 29 aislados fueron evaluadas en plántulas de trigo cv. PanteraINIA establecidas en macetas con sustrato estéril inoculado con los aislados. Doce aislados de Ggt pertenecieron al grupo genético (G) 2, mientras uno fue clasificado como G1. Cuatro aislados de Ggt no amplificaron para los dos grupos genéticos descritos, y patrones RAPD mostraron que pertenecían a un nuevo grupo genético (G3) y causaron un daño en raíces que varió en severidad entre un 50 y 90%. Siete aislados de P. pontiformis fueron amplificados con partidores asociados al Grupo G1 de Ggt y presentaron niveles variable de severidad (5 a 65%). Seis aislados de Gga fueron patógenos débiles en trigo pero fueron altamente agresivos en avena. Resultados sugieren evaluar como este conjunto de hongos interactúan y causan pérdidas en sementeras del sur de Chile.

    Agradecimientos: Trabajo financiado por Proyecto Fondecyt de Iniciación N°11110105.

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    Susceptibilidad/tolerancia de variedades e híbridos comerciales de raps canola, al pié negro o “foma” (Leptosphaeria maculans), en el sur de Chile

    Susceptibility/tolerance of canola rapeseed varieties and hybrids, to blackleg (Leptosphaeria maculans) in Southern Chile Orlando Andrade; Cesar Morales Escuela de Agronomía, Universidad Católica de Temuco; Est. Exp. Agro del Sur, Perquenco, Chile E-Mail: oandrade54@gmail.com

    La superficie de raps canola en Chile ha experimentado un notable aumento, debido principalmente a la demanda de la industria del salmón y del aceite para consumo humano. La enfermedad de mayor impacto y prevalencia en el sur del país es el pié negro, causado por el hongo hemibiotrofo ascomicete Leptosphaeria maculans. A pesar del significativo impacto de esta enfermedad sobre la producción de raps, son escasas las referencias y menos la información científica, relativas al comportamiento de las variedades e híbridos comercializados en el país, frente a esta patología. Las temporadas 2011-2012 y 2014-2015, se realizaron trabajos experimentales de campo, tendientes a determinar el grado de susceptibilidad/tolerancia de 4 y 6 variedades e híbridos, respectivamente, al pié negro. Se establecieron parcelas experimentales de 10 m2 c/u, inoculadas, con 3 o 4 repeticiones, con y sin protección de fungicidas. Se registraron notas de infección foliar en escala de 0 a 100%, en base a una muestra de 20 plantas por parcela y posteriormente, a la cosecha, notas de infección de cuello en escala de 0 a 6, sobre un total de 100 cañas por parcela. La información obtenida permitió clasificar las diferentes variedades evaluadas, dentro de un rango de susceptibilidad/tolerancia al pié negro, información que fue consistente en aquellas variedades incluidas en ambas temporadas. Los híbridos Exagone, Expower y Artoga presentaron los mejores niveles de tolerancia al pié negro, mientras que Rohan, Nelson y Expertise se comportaron como muy susceptibles a la enfermedad. Por su parte el híbrido Sheriff se comportó como moderadamente susceptible. Conjuntamente con esta información, se observó que ante un mismo y probadamente eficaz tratamiento fungicida, la respuesta de las variedades e híbridos más susceptibles aparece disminuida. Este aparece como el primer estudio en el país, sobre la susceptibilidad de variedades e híbridos comerciales de raps canola al pié negro en Chile.

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    Falsos positivos en detección molecular de Candidatus Liberibacter en Citrus asociados a bacterias endófitas

    False positives in molecular detection of Candidatus Liberibacter in Citrus associated to endophytic bacteria Rocío Camps; Ximena Besoain Escuela de Agronomía, Facultad de Ciencias Agronómicas y de los Alimentos, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso, Quillota Chile E-Mail: ximena.besoain@pucv.cl

    En casi todo el mundo la citricultura está siendo amenazada por la rápida expansión de la enfermedad Huanglongbing (HLB), causada por 3 especies de proteobacterias del género Candidatus Liberibacter spp. Se considera esta enfermedad como una de las más destructivas de los cítricos en el mundo, por la severidad de los síntomas, la rapidez con la que se dispersa y porque aún no tiene tratamiento curativo. La detección temprana puede ser difícil ya que los síntomas pueden tardar más de un año en hacerse evidentes y por qué los síntomas en hojas pueden parecerse a otras enfermedades o déficit nutricional. El desarrollo de la bacteria es sensible a las temperaturas, lo cual es determinante en la concentración que se encuentre, el periodo de latencia y la manifestación de síntomas. En Chile aún no ha sido descrita esta enfermedad pero es necesario contar con técnicas de alta confiabilidad para la detección temprana. Con el objetivo de verificar y validar la ausencia de HLB en plantas del banco germoplasma de Cítricos se sometieron distintas variedades a dos temperaturas óptimas para el desarrollo de la enfermedad durante seis meses. Luego fueron evaluadas con un Kit comercial para la detección de Candidatus Liberibacter spp. por qPCR (Plant Print, Diagnostic). Las plantas no presentaron síntomas asociados a la enfermedad, pero dos plantas si arrojaron resultados positivos según qPCR. Se inocularon plantas nuevas a través de parches desde plantas positivas y se incubaron por 10 meses. Todas las plantas injertadas fueron verificadas con la misma metodología previa a la inoculación. Luego de la incubación se obtuvieron resultados positivos de las inoculadas. Para descartar falsos positivos se aislaron 15 bacterias endófitas asociadas a las plantas positivas. Las bacterias fueron evaluadas con la misma metodología de qPCR arrojando dos de ellas amplificación. Las bacterias aún se encuentran en proceso de identificación descartándose que correspondan al género Candidatus Liberibacter ya que éste no ha sido posible su aislamiento in vitro.

    Agradecimiento: Financiado por Vicerrectoría de Investigación y Estudios Avanzados VIREAPUCV Proyecto DI 037.450/2013.

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    Determinación de Botrytis cinerea en aislados monospóricos provenientes de parronales de la zona central de Chile

    Determination of Botrytis cinerea in monosporic isolates obtained from grapevines of central Chile Rocío Camps; Mauricio Pastén; Ximena Besoain Escuela de Agronomía, Facultad de Ciencias Agronómicas y de los Alimentos, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso, Quillota, Chile E-Mail: rocio.camps@pucv.cl

    El género Botrytis posee importantes patógenos que atacan a innumerables cultivos, causantes de enfermedades destructivas y de importancia para nuestro país. Estudios recientes han descubierto que una nueva especie determinada como Botrytis pseudocinerea se encuentra asociada a pudrición gris en vid, y que su detección mediante caracteres morfológicos (tamaño de esporas, tasa de germinación o crecimiento del micelio) no permite su diferenciación entre aislados de Botrytis cinerea. Incluso ambas especies pueden encontrarse en sincronía generando una misma patología. Hay escasos estudios de esta nueva especie y de a poco algunos países la han determinado asociada a otros cultivos. Para poder identificar estos dos organismos se han estudiado métodos moleculares que amplifican genes que codifican proteínas nucleares (RPB2, G3PDH, y HSP60) que nos permitirían diferenciar entre ambas especies. Por lo tanto, este trabajo tuvo como objetivo verificar mediante técnicas moleculares que especie(s) de Botrytis estaban asociadas a bayas de racimos de uva de mesa cv. Thompson Seedless provenientes de diferentes localidades de la zona central de Chile. Se seleccionaron 10 aislados del género Botrytis colectados desde bayas de uva de mesa cv. Thompson Seedless con síntomas de pudrición gris al momento de la cosecha (mes de febrero 2015). A partir de cultivos monospóricos se extrajo el DNA de los aislados y se amplificaron por PCR los genes ITS, RPB2, G3PDH y HSP60. Los productos fueron secuenciados y verificados mediante la base de dato Blast-NCBI. Todos los aislados evaluados fueron determinados como Botrytis cinerea con un valor de identidad sobre un 97%. Este trabajo permitió corroborar la identificación de esta especie en racimos de uva de mesa cv. Thomson Seedless al momento de la cosecha.

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    Uso de técnica convencional y qPCR como predictores de incidencia de Botrytis cinerea en uva de mesa cv. Thompson Seedless en cosecha y poscosecha

    Conventional technic and qPCR as Botrytis cinerea incidence predictors at harvest and postharvest in Thompson Seedless table grapes Mauricio Pastén1 ; Marcela Esterio2 ; Rocío Camps1 ; Virginia Garretón3 ; Ximena Besoain 1 1 Escuela de Agronomía, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso 2 Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Depto. de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile 3 Escuela de Biotecnología, Universidad Santo Tomás E-Mail: ximena.besoain@pucv.cl

    La pudrición gris causada por Botrytis cinerea Pers. (Bc), ocasiona importantes pérdidas económicas en uva de mesa en Chile y a nivel mundial, presentándose distintos niveles de presión de esta enfermedad. Sin duda, un aspecto importante para el sector exportador es contar con la información que permita predecir en forma oportuna la incidencia de esta enfermedad en poscosecha. El objetivo del presente estudio fue evaluar en predios de uva de mesa cv. Thompson Seedless localizados en la zona central de Chile, la incidencia de Bc en precosecha determinada mediante el método convencional (cámara húmeda) y qPCR y, su correlación con la incidencia de pudrición gris en cosecha y postcosecha en racimos de uva. Con este propósito se cosecharon completamente al azar 40 racimos en precosecha y cosecha, en 10 predios y se evaluó la incidencia causada por Bc mediante cámara húmeda y la estimación de presencia de Bc mediante qPCR empleando iniciadores convencionales, sobre muestras compuestas de 10 bayas por racimo (previa confirmación de calibración de la curva de DNA de Bc igual a R2 =0,99). Posteriormente se procedió a realizar una regresión lineal entre los niveles de incidencia de Bc detectados en precosecha, cosecha y poscosecha luego de 60 días de almacenamiento refrigerado con la técnica convencional y los estimados mediante qPCR. El R2 obtenido con los niveles de incidencia de Bc detectados con la técnica convencional en precosecha v/s cosecha y v/s poscosecha fueron 0,88 y 0,8, respectivamente; mientras que la incidencia estimada mediante qPCR, en los mismos periodos, de 0,868 y 0,70. Los resultados obtenidos permiten señalar que ambos métodos son comparables y podrían ser utilizados como predictores de la incidencia de pudriciones por Botrytis cinerea en cosecha y poscosecha.

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    Diplodia seriata causando pudriciones de manzana cvs. Fuji y Pink lady de pre-cosecha en la Región del Maule

    Diplodia seriata associated with pre-harvest decay on apple cvs. Fuji and Pink lady in the Maule Region Marcela Caceres; Teresa Daza; Katherine Breves; Mauricio Lolas; Gonzalo Díaz Laboratorio de Patología Frutal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile E-Mail: mcaceres@utalca.cl

    Chile es considerado el cuarto exportador de manzanas en el mundo, siendo la Región del Maule la más importante en superficie y exportación. Entre los principales factores que afectan la calidad de los frutos de manzano en pre-cosecha y postcosecha están las enfermedades, entre las que se destacan: ‘ojo de buey’ (Neofabraea alba), ‘moho gris’ (Botrytis cinerea) y ‘moho azul’ (Penicillium expansum). Las Botryophaereaceas causan enfermedades en un amplio rango de plantas, incluyendo pudriciones de frutos como la manzana. Durante la última temporada se observó una inusual pudrición en época de pre-cosecha asociado a eventos de lluvia en la Región del Maule. Con el propósito de identificar el agente causal de esta enfermedad se colectaron manzanas cv. Fuji y cv. Pink lady (n=250 frutos) con síntomas de pudrición blanda, acuosa que externamente se observaba de color negro. Las manzanas con los síntomas descritos anteriormente, fueron desinfectadas superficialmente y trozos desde la zona de avance de la pudrición interna fueron colocados en placas Petri con APD + IGEPAL por 7 días a 20°C. Los aislados obtenidos fueron identificados como Diplodia seriata mediante características morfológicas y moleculares, utilizando ITS y β-tubulina. Seis aislados se caracterizaron mediante análisis filogenético, sensibilidad a fungicidas y patogenicidad. Los resultados obtenidos indican que los aislados de D. seriata fueron sensibles a fungicidas y patogénicos. De acuerdo a nuestros antecedentes este problema tuvo una prevalencia entre 2% a 15% en la Región del Maule.

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    Estatus actual de la muerte regresiva de brazos en Kiwi cv. Hayward in Chile

    Current status of kiwifruit arm dieback in cv. Hayward in Chile Gonzalo Díaz1 ; Mauricio Lolas1 ; Bernardo Latorre2 ; Juan Zoffoli2 1 Laboratorio de Patología Frutal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile 2 Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile E-Mail: g.diaz@utalca.cl

    El kiwi (Actinidia deliciosa) es uno de los frutales más importantes en Chile. La industria Chilena del kiwi comprende sobre 9.000 ha de superficie, representando un impacto económico importante para Chile. La muerte regresiva de brazos se ha convertido en un problema importante para los productores de kiwis chilenos en los últimos 10 años. Sin embargo, un estudio sistemático de la importancia de la muerte regresiva de brazos y la identificación de los principales agentes causales, aún no han sido completados. Por lo tanto, un estudio en huertos productivos fue conducido a través de diferentes zonas importantes para determinar la prevalencia y la identidad de los principales patógenos asociados con la muerte regresiva de kiwi en Chile. Un total de 170 muestras de brazos obtenidos durante una prospección durante el 2013 y 2014, fueron colocadas en placas con APD más antibiótico e Igepal. Cultivos fueron identificados por morfología y molecularmente usando los genes de la región ITS, porción del gen de beta tubulina y fator de elongación 1-alfa. Los resultados permitieron determinar una prevalencia entre un 5 y 75% de muerte regresiva de brazos en huertos de kiwis de 8 a 25 años de edad. Basados en la morfología y análisis filogenéticos, se identificó a varias especies de las familias Botryosphaeriaceae, Diaporthaceae como bien especies de los géneros Cadophora y Phaeacremonium. Este estudio revela que la muerte regresiva de brazos en Chile está asociado a un complejo fungoso. Especies de Diaporthe, Neofusicoccum, Cadophora y Phaeacremonium son aparentemente los más frecuentes patógenos fungosos asociados a muerte regresiva de brazos en Chile.

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    Caracterización molecular de aislamientos de hongos del genero Fusarium asociados a Aguacate, en el Valle del Cauca-Colombia

    Molecular characterization of Fusarium isolates associated with Avocado plants in Valle del CaucaColombia Edwin Henao; Eyder Gómez; Carlos Hernández; Claudia Salazar; Martha Velasco Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira. Grupo de Investigación Protección Vegetal para el Mejoramiento de la Productividad E-Mail: edhenaoh@unal.edu.co

    En la actualidad, el fruto del aguacate se produce en la mayoría de los países de clima cálido y templado. Su producción en el ámbito mundial y, específicamente, en Colombia ha mostrado grandes avances; sin embargo, las enfermedades fitosanitarias continúan siendo los principales problemas en la producción de los mismos. Entre éstas se encuentran los agentes patógenos que dificultan el establecimiento y desarrollo del cultivo, tal como algunas especies del género Fusarium, consideradas de importancia económica por las pérdidas que generan a numerosos cultivos, entre los que se encuentra el aguacate. Por lo tanto, con el objetivo de caracterizar las poblaciones de Fusarium presentes en el aguacate, se realizó el aislamiento de diferentes órganos afectados y provenientes de localidades ubicadas en seis municipios del Valle del CaucaColombia. Luego, se seleccionaron y purificaron los aislamientos pertenecientes al género de interés para realizar la extracción de ADN y amplificación de la región TEF-1 alpha. Posteriormente, los productos de PCR fueron secuenciados y comparados con las base de datos del NCBI (National Center for Biotecnology Information) y del Fusarium ID. Los resultados obtenidos mediante la secuenciación arrojaron que los aislamientos pertenecen a: Fusarium solani, Fusarium incarnatum, Fusarium oxysporum, Fusarium fujikuroi y Fusarium austroamericanum, siendo las tres primeras especies, las de mayor ocurrencia en las muestras evaluadas. Finalmente, para el análisis de las relaciones filogenéticas realizado mediante el programa MEGA 6, se usó el coeficiente de similitud del vecino más cercano, lo que permitió observar una gran variabilidad entre los aislamientos evaluados.

    Agradecimientos: A la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira, por la financiación de este proyecto, como también a la profesora Luisa Efigenia Hoyos por su colaboración.

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    Detección temprana no destructiva de Chondroestereum purpureum, agente causal del Plateado en manzano

    Early and non-destructive detection of Chondrostereum purpureum, causal agent of apple silverleaf disease Javier Chilian; Daina Grinbergs; Andrés France Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIA, Centro Regional de Investigación Quilamapu, Chillán, Chile E-Mail: dgrinbergs@inia.cl

    El Plateado de los frutales, causado por el hongo Basidiomycete Chondrostereum purpureum, es una enfermedad ampliamente diseminada en Chile. En manzano afecta principalmente a las variedades más plantadas y exportadas como Royal Gala y Fuji Raku Raku, disminuyendo la vida útil de huertos y viveros, provocando pérdidas de rendimiento mayores al 35% y reduciendo la calidad de la fruta. Los síntomas foliares corresponden al color plateado de las hojas y son causados por una enzima tipo endopoligalacturonasa (endoPG), sin embargo, estos no son perceptibles hasta el tercer año post infección. Además, esta enfermedad no tiene un control curativo eficiente, por lo que es muy relevante contar con un diagnóstico temprano. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un método de diagnóstico precoz y no invasivo de la enfermedad, utilizando la técnica inmunológica ELISA para detectar la endoPG en las hojas. Para realizar lo anterior se sintetizó el anticuerpo monoclonal endoPG y se desarrolló el protocolo DAS ELISA. Se analizaron plantas enfermas de un huerto comercial de siete años presentando distinto nivel de síntomas: leve, moderado y severo. Se utilizó como control positivo la toxina purificada y como control negativo hojas de plantas sanas. Además, se analizaron plantas enfermas de tres años sin síntomas foliares. La presencia del patógeno en plantas enfermas fue confirmada a través del aislamiento de tejido necrótico del tallo en agar papa dextrosa al 25% de concentración y PCR. En cada una de las pruebas la técnica pudo detectar a la endoPG, en una concentración de 9 µg/g peso fresco en las plantas enfermas sin síntomas, a 22,5 µg/g en plantas con síntomas severos. La sensibilidad y eficacia de este método hacen que en el futuro se pueda utilizar como base para desarrollar un kit de diagnóstico comercial, lo que permitiría disminuir la diseminación del patógeno.

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    Identificación discriminativa de la variante filogenética de Pseudomonas syringae pv. actinidiae biovar 3 presente en Chile

    Discriminative identification of the Chilean Pseudomonas syringae pv. actinidiae biovar 3 phylogenetic variant Isabel Pérez; Lorena Pizarro; Marcela Esterio; Jaime Auger Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile Santiago, Chile E-Mail: jauger@uchile.cl

    Los cultivos de kiwi en Nueva Zelanda, Italia y Chile son afectados por la bacteria Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa), agente causal del cancro bacteriano. La Psa presente en cada uno de estos países corresponden a tres grupos filogenéticos distintos del biovar 3 caracterizado por ser el de mayor patogenicidad, por tener una región de alta variabilidad en un elemento conjugativo e integrativo (ICE) vinculado a la virulencia de la bacteria y a potenciales diferencias de virulencia entre las tres variantes de Psa: Nueva Zelanda (Nz), Italia (It) y Chile (Cl). Para el desarrollo de una estrategia de identificación discriminativa de estas tres variedades de Psa se seleccionaron tres regiones del ICE y diseñaron un conjunto de tres pares de partidores específicos que amplifican fragmentos de 820, 800 y 640 pares de bases. Utilizando las secuencias de estas regiones de cepas Nz, It y Cl de Psa, previamente descritas, se generaron arboles filogenéticos, los cuales separaron en grupos distintos, a las tres variantes de Psa, demostrando la eficacia de esta estrategia. Mediante este metodología se determinó que 21 aislados de Psa colectados de huertos Psa (+) de las regiones VI y VII corresponden a la variante Cl. Estos resultados nos permiten concluir que las cepas de Psa biovar 3 analizadas pertenecen únicamente a Psa del tipo Cl, no habiendo registro de la presencia de las variantes Nz ni It. Esta estrategia permitirá la generación de una herramienta molecular para la detección de la bacteria y en conjunto, la identificación de la variante de Psa. Siendo el cancro bacteriano del kiwi una enfermedad cuarentenaria de control obligatorio, esta herramienta de diagnóstico permitirá pesquisar la posible introducción de alguna de las otras variantes de Psa al país mediante germoplasma de kiwi proveniente de Nueva Zelanda o Italia.

    Agradecimientos: Este estudio se desarrolló en el marco del Proyecto “Prevención de la Bacteriosis del kiwi en O´Higgins”, código IDI 30135568-0, financiado a través del Fondo de Innovación para la Competitividad (FIC) del Gobierno Regional de O’Higgins y al Dr. Matt Templeton y Dr. Mark Andersen de Plant and Food Research, Auckland, New Zealand, por proveer a la investigación de muestras de ácido nucleico de Psa.

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    Cancro bacteriano del kiwi causado por Pseudomonas syringae pv. actinidiae: origen de la epifítia en Chile

    Kiwifruit bacterial canker (Pseudomonas syringae pv. actinidiae): outbreak origin in Chile Jaime Auger; Isabel Pérez; Lorena Pizarro; Marcela Esterio Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile E-Mail: jauger@uchile.cl

    El cancro bacteriano del kiwi causado por Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa) es la principal patología que afecta al cultivo. Las recientes epifítias reportadas en los tres principales países productores de kiwi en el mundo (Italia, 2008; Nueva Zelanda, 2010 y Chile, 2011), ha afectado y encarecido su producción. De acuerdo a las características fenotípicas, patogénicas y genómicas de la bacteria, ésta se clasifica en tres diferentes biovares: 1, 2 y 3. A partir de huertos Psa (+) de las regiones de O’Higgins y Maule, se recuperó e identificó a 21 aislados. El patrón genético característico de todos los aislados fue determinado mediante la presencia de los genes hrpk1, omp 1K, rpoD y avrD y la ausencia de los genes hopA1, cfl, syrC y syrD. A través del análisis filogenético utilizando la información generada a partir de los genes constitutivos cts y gyrB y de los genes previamente mencionados, se determinó que la totalidad de los aislados analizados correspondieron a Psa biovar 3, mismo biovar que incluye a cepas causantes de las epifítias en China (1994), Italia (2008) y Nueva Zelanda (2010) a la fecha. Mediante la amplificación y análisis de regiones con alta variabilidad de elementos conjugativos e integrativos, se diferenció filogenéticamente a la cepa chilena biovar 3, de aquellas presentes en Italia y Nueva Zelanda. Además, de acuerdo a estudios filogenéticos, realizados en Francia, utilizando marcadores polimórficos del genoma de cepas de Psa de diverso origen geográfico, se estableció que a pesar de que los aislados de Nueva Zelanda y de Chile poseen diferencias filogenéticas entre ellos, ambos tienen similitud con cepas de origen Chino. Todos estos antecedentes permiten concluir que la epifítia chilena de Psa biovar 3 no tendría su origen en Nueva Zelanda o Italia, sino posiblemente en China.

    Agradecimientos: Este estudio se desarrolló en el marco del Proyecto “Prevención de la Bacteriosis del kiwi en O´Higgins”, código IDI 30135568-0, financiado a través del Fondo de Innovación para la Competitividad (FIC) del Gobierno Regional de O’Higgins.

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    Análisis multilocus de aislados de Pseudomonas syringae pv. actinidiae que presentan diferentes grados de patogenicidad

    Multilocus analysis of isolates of Pseudomonas syringae pv actinidiae showing different degrees of pathogenicity Alan Zamorano1 ; Ernesto Vega2 ; Stefano Ardizzi3 ; Enrico Biondi3 ; Assunta Bertaccini3 ; Nicola Fiore1 1Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile 2 Servicio Agrícola y Ganadero, Laboratorios y Estaciones Cuarentenarias de Lo Aguirre, Santiago, Chile 3 DipSA, Plant Pathology, Alma Mater Studiorum, University of Bologna, Italy E-Mail: agezac@u.uchile.cl

    Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa) es el agente causal de la enfermedad llamada “Cancro bacteriano del kiwi”, de amplia distribución en el país y que causa grandes pérdidas a nivel mundial. Hasta el momento, los análisis moleculares han permitido la definición de tres grupos filogenéticos de esta bacteria, asociados tanto a distribución geográfica como a patogenicidad. Dos aislados chilenos fueron completamente secuenciados en el año 2013, formando un grupo monofilético con aislados de Italia y Nueva Zelanda. Particularmente entre los aislados italianos, se obtuvieron durante el año 2014, dos aislados con bajos niveles de patogenicidad, confirmados como Psa a través de análisis bioqúimicos y de PCR específico. A pesar de la importancia de la enfermedad, en nuestro país no se han realizado estudios de caracterización molecular en un mayor número de aislados. Durante fines de otoño del año 2013, se obtuvieron aislados de Psa del llanto del kiwi. Los aislados fueron confirmados por PCR específico y por pruebas bioqúimicas. Posteriormente se amplificaron por PCR, clonaron y secuenciaron siete genes conservados (acn, cts, gap, gyrB, pfk, pgi y rpoD) para concatenar sus secuencias y establecer relaciones filogenéticas, según lo descrito en la literatura. Paralelamente en Italia, se realizó el mismo análisis multilocus con los aislados de baja patogenicidad para ser incluidos en el estudio filogenético. En concordancia con lo observado en los estudios anteriores, todos los aislados chilenos se asociaron al grupo filogenético 3 de Psa, y no mostraron diferencias genéticas importantes. Los aislados de baja patogenicidad de Italia, presentaron una asociación con los aislados del grupo 3 de Psa, exhibiendo una leve divergencia genética, que no implica una separación del cluster principal. Este trabajo permite confirmar el análisis multilocus como una herramienta útil para la clasificación molecular de Psa, lo cual podría ser mejorado incluyendo las secuenciación de genes asociados a mecanismos de patogenicidad bacteriana.

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    Efectividad de Fluazinam en el control de Neofusicoccum australe en arándanos

    Fluazinam effectiveness in the control of Neofusicoccum australe on blueberries Javiera Molina1 ; Valeria Arriagada1 ; Luz M. Pérez1 ; Raúl Arriaga2 ; Mel Grove2 ; Jaime Montealegre1 1 Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades (LFCBE), Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile 2 ISK Biosciences Corporation, USA E-Mail: javiera.molina.b@gmail.com

    El cultivo del arándano es afectado por diversos patógenos dentro de los cuales se encuentran especies de hongos del género Botryosphaereacea como Neofusicoccum australe. Se evaluó la efectividad in vitro e in vivo de fluazinam (Shirlan 500 SC). Para ello se determinó la EC50 de fluazinam para N. australe exponiendo discos de micelio del patógeno a distintas concentraciones de fluazinam en medio de cultivo APD. Se calculó la EC50 mediante probit obteniéndose un valor de 0,0073 ppm i.a. Para los ensayos in vivo se realizó una misma metodología en dos lugares distintos, uno en las dependencias del LFCBE, bajo condiciones controladas y uno en campo. Se aplicó fluazinam y en mezcla con azoxystrobin (Quadris) en ramillas de arándanos cv. Brigitta. Las ramillas en receso invernal, fueron seleccionadas según grosor (3-5 mm), posteriormente se les realizó un corte en la parte apical para luego aplicar los tratamientos (T0: testigo, TA: testigo sin patógeno, T1: fluazinam 730 g.i.a.ha-1 , T2: fluazinam + azoxystrobin (438 + 109 g.i.a.ha-1 ), T3: fluazinam + azoxystrobin (584 + 219 g.i.a.ha-1 ), T4: tiofanato de metilo (2800 g.i.a.ha-1 ) vía aspersión. Luego fueron inoculadas con discos de micelio del patógeno en tres diferentes tiempos: 24 horas, 10 y 14 días de aplicados los tratamientos. Se evaluó el tamaño de la lesión (30 días, ensayo en laboratorio y 60 días, ensayo en campo), se realizó un ANOVA y test de Fisher (LSD). Fluazinam ejerce un buen control de N. australe, inhibiendo el desarrollo de las lesiones sobre un 60% en todos los tiempos de inoculación. La mezcla de fluazinam + azoxystrobin (dosis alta) ejerce el mejor control, sobre un 70%. Los fungicidas evaluados mantienen un buen efecto residual por al menos 14 días logrando inhibir el desarrollo de las lesiones por sobre un 50%.

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    Ocurrencia de aislados de Venturia inaequalis resistente a trifloxyestrobin en la Región del Maule

    Occurrence of Venturia inaequalis isolates resistant to trifloxyestrobin in the Maule Region Raúl Méndez1 ; Mauricio Lolas1 ; Sylvana Soto2 ; Gonzalo Díaz1 1 Laboratorio de Patología Frutal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile 2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación La Platina, Santiago, Chile E-Mail: rmendez@utalca.cl

    La ‘sarna del manzano’ causada por el hongo Venturia inaequalis, es la enfermedad más importante del manzano en Chile. El control químico de la sarna del manzano se basa principalmente en aplicaciones foliares de fungicidas durante las etapas más predisponentes para la ocurrencia de infección. En los últimos años se ha observado pérdida de efectividad de fungicidas sobre esta enfermedad en algunos huertos comerciales de la zona central de Chile, principalmente debido a la presión de selección ejercida por aplicaciones consecutivas de fungicidas. En este trabajo se evaluó la sensibilidad in vitro de diferentes aislados de V. inaequalis, provenientes desde distintos huertos comerciales y no comerciales de la Región del Maule, a los activos trifloxystrobin, pyrimethanil, difenoconazole y penthiopyrad. Se evaluó la inhibición de germinación de conidias e inhibición de crecimiento micelial para todos los fungicidas, utilizándose concentraciones entre 0,0001 – 20 µg ml-1. Mediante las pruebas in vitro se determinaron las concentraciones efectivas medias (CE50). Las pruebas de inhibición de la germinación conidial, permitieron demostrar que el 7% de los aislados extraídos desde huertos comerciales fueron resistentes al fungicida trifloxystrobin, presentando nula inhibición a dosis de 10 µg ml-1. Por otra parte, se logró determinar la presencia de aislados de V. inaequalis sensibles a difenoconazole y pyrimethanil, a través de las pruebas in vitro. Este trabajo es la primera determinación de la ocurrencia de aislados chilenos de V. inaequalis resistentes a trifloxystrobin.

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    Fungicidas VITISEAL y SPUR SHIELD (BSP-100) previenen el desarrollo de lesiones causadas por Botryosphaeriaceae en vides

    VITISEAL and SPURSHIELD (BSP-100) fungicides prevent the development of lesions caused by Botryosphaeriaceae in vines Carolina Torres; Diego Valencia; Ximena Besoain Escuela de Agronomía, Facultad de Ciencias Agronómica y de los Alimentos, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso, Valparaíso, Chile E-Mail: carolina.torres@pucv.cl

    En los últimos años se ha descrito a Botryosphaeriaceae asociado a cancrosis y muerte de brazos en vides. En Chile trabajos previos han demostrado que las principales especies aisladas desde muerte de brazos son: Diplodia seriata, D. mutila y Neofusicoccum parvum. Por tal motivo esta investigación tuvo como objetivo evaluar la eficacia de los fungicidas Vitiseal y Spurshield aplicados como aspersión para el control preventivo de cancrosis causadas por Botryosphaeriaceae en un viñedo cv. Cabernet Sauvingnon ubicado en Isla de Maipo, Región Metropolitana. Para la obtención del inóculo, se utilizaron una mezcla de cepas de: D. seriata, D. mutila y Neofusicoccum parvum recuperadas del Banco de Hongos del Laboratorio de Fitopatología, las que fueron recuperadas y multiplicadas en APDA y luego incubadas a 25°C durante 4 semanas hasta formación de conidios. En terreno, 48 horas antes de la aplicación, todas las plantas fueron podadas en forma horizontal. Al día siguiente se aplicaron los tratamientos con bomba de espalda en forma de aspersión, aplicando: T0= sólo agua; T1= 0,5 L/ha de Vitiseal y T2 = 0,5 L/ha de Spurshield. Al día siguiente se realizó la inoculación, depositando 50 µl sobre cada sarmiento marcado a una concentración de 1*105 ufc/ml. La evaluación se realizó 48 días postinoculación, podándose los sarmientos a 40 cm y se midió el largo de la estría, procediendo a realizar aislamientos a partir de la zona de avance de las lesiones. Los resultados obtenidos se analizaron mediante análisis de varianza y las medias fueron comparadas mediante test de Duncan (p ≤ 0,05). Los tratamientos con Vitiseal (T1) y Spurshield (T2) lograron reducir la lesión provocada por especies de Botryosphaeriaceae y la recuperación del inóculo desde lesiones en comparación con el testigo (T0). Aspersiones foliares efectuadas con los fungicidas Vitiseal y Spurshield a sarmientos podados, logran reducir en forma significativa la lesión causada por especies de la familia Botryosphaeriaceae.

    Agradecimientos: Proyecto financiado por Empresa Summit Agro Chile.

    Comunicaciones Orales

    Línea base de sensibilidad de aislados chilenos de Botrytis cinerea recuperados desde uva de mesa a fluopyram

    Baseline sensitivity of Chilean Botrytis cinerea isolates from table grapes to fluopyram Marcela Esterio1 ; María José Araneda1 ; Mauricio Rubilar1 ; Charleen Copier1 ; Loreto Ozimica2 ; Jaime Auger1 1 Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Depto. de Sanidad Vegetal, Fac. de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile 2 Bayer S.A., División CropScience, Chile E-Mail: mesterio@uchile.cl

    Las carboxamidas son importantes herramientas para el control químico de Botrytis cinerea (Bc); actúan inhibiendo la enzima succinato deshidrogenasa (SDH). Actualmente, boscalid es la única molécula en uso en Chile, habiéndose ya detectado ciertos niveles de pérdida de sensibilidad asociados a presencia de mutaciones en el gen sdhB (H272R/Y/L y P225L/H). Según estudios precedentes, algunas de estas mutaciones confieren resistencia cruzada positiva a moléculas del mismo grupo. La mayoría de los nuevos botryticidas prontos a introducirse en el país pertenecen a este grupo (fluopyram, isofetamida, penthiopyrad). El objetivo del presente estudio fue determinar, mediante ensayos in vitro en medio Succinato, la línea base de sensibilidad a fluopyram en aislados de Bc (n=70), nunca antes sometidos a esta molécula y sensibles a boscalid (0,151000µg/mL), y sobre aislados resistentes que presentaban las mutaciones H272R/Y/L y P225L. El valor EC50 promedio de fluopyram para germinación conidial fue 0,16µg/mL, fluctuando entre 0,020 y 0,36µg/mL, obteniéndose para elongación del tubo germinativo valores aún menores. Fluopyram presentó un mayor nivel de inhibición que boscalid sobre aislados de distinto nivel de sensibilidad inicial, incluso sobre los más resistentes. Similar comportamiento se obtuvo sobre la elongación del tubo germinativo. Todos los aislados que presentaron las mutaciones en el codón 272, fueron más sensibles, no así los que presentaban la P225L. Los resultados obtenidos señalan a fluopyram como una promisoria alternativa de control de Botrytis, que permitiría recuperar la sensibilidad a boscalid en poblaciones en que predominen las mutaciones H272R/Y/L, que hasta el momento son las más frecuentes en Chile. Sin embargo, es importante señalar que un uso inadecuado de fluopyram podría generar una mayor frecuencia de la mutación P225L, y con ello alta resistencia a la mayoría de las carboxamidas.

    Agradecimientos: Proyecto de investigación U. de Chile – Bayer S.A., División CropScience Chile y Plataforma on line de sensibilidad a botryticidas U. de Chile / InnovaChile de CORFO.

    Comunicaciones Orales

    Caracterización genética de aislados de Botrytis spp. de distinto nivel de sensibilidad a fungicidas inhibidores de SDH en arándanos

    Genetic characterization of Botrytis spp. Chilean isolates with different levels of sensitivity to inhibitors SDH fungicides in blueberries Geovanny Julca; Marcela Esterio; Lorena Pizarro; María José Araneda; Charleen Copier; Mauricio Rubilar; Jaime Auger Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago-Chile E-Mail: mesterio@uchile.cl

    El cultivo del arándano en Chile, ha experimentado en los últimos años un sostenido crecimiento y Botrytis spp., es una de las limitantes más importantes que lo afecta. Los inhibidores de la enzima succinato deshidrogenasa (SDHIs) son una de las moléculas fungicidas base de los programas de control químico de botrytis. Boscalid es el único fungicida de este grupo actualmente registrado en el país. La pérdida de sensibilidad a boscalid ha sido asociada a la presencia de mutaciones en los genes sdh que codifican para las subunidades del complejo SDH del patógeno. El objetivo de este estudio fue identificar las mutaciones presentes en los genes sdhB y sdhC en poblaciones de Botrytis spp. de distinto nivel de sensibilidad a boscalid en las principales zonas productoras de arándano en Chile y, evaluar el efecto in vitro de otras carboxamidas próximas a introducirse (fluopyram e isofetamida) en un número representativo de aislados resistentes. Mediante la amplificación (PCR), secuenciación y alineamiento de los genes sdhB y sdhC de aislados resistentes se detectaron las mutaciones H272R/Y (sdhB), previamente reportadas en vid y otros cultivos, y la mutación G37S en el gen sdhC. Se comprobó que la mutación H272Y confiere una mayor sensibilidad hacia otras moléculas SDHIs; los aislados resistentes a boscalid con esta mutación, se comportaron como altamente sensibles a fluopyram e isofetamida (valores EC50 fluctuantes entre 1,62*10-2 µg.mL-1 / 4,05*10-2 µg.mL-1 y 6,50*10-2 µg.mL-1 /6,79*10-2 µg.mL-1 , respectivamente). Los aislados con las mutaciones H272R y G37S presentaron valores EC50 para fluopyram e isofetamida similares a aislados sensibles (EC50<15 µg.mL-1 ). La sustitución de glicina por serina detectada en el codón 37 del gen sdhC (G37S), no ha sido descrita previamente y señala que en arándanos la pérdida de sensibilidad a boscalid no estaría asociada solo a mutaciones en el gen sdhB.

    Agradecimientos: Proyecto InnovaChile de CORFO/FDF/Comité de Arándanos (Código: 12BPC2- 13492)/U. de Chile y Plataforma on line de sensibilidad a botryticidas, U. de Chile / InnovaChile de CORFO.

    Comunicaciones Orales

    Determinación de sensibilidad a cyprodinil + fludioxonil, genotipos y fenotipos de aislados de Botrytis cinerea obtenidos desde viveros de eucalipto

    Sensitivity to determination to cyprodinil + fludioxonil, genotypes and phenotypes for Botrytis cinerea isolates obtained from eucalypt nurseries Myriam Solís1 ; Marcela Esterio2 ; Eugenio Sanfuentes1 1Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Forestales y Centro de Biotecnología, Laboratorio de Patología Forestal, Concepción, Chile 2 Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas. Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Santiago, Chile. E-Mail: esanfuen@udec.cl

    La enfermedad “moho gris”, causada por Botrytis cinerea, constituye el principal problema fitosanitario en viveros de eucalipto en Chile. Las frecuentes aplicaciones de fungicidas para el control del moho gris y las características propias del patógeno, como su profusa esporulación, determinan un potencial riesgo para la pérdida de sensibilidad en la población del patógeno. Entre los eficaces botriticidas usados en viveros esta la mezcla cyprodinil + fludioxonil (Switch®), para la cual ya existen reportes de aislados resistentes en viñedos del país. El objetivo fue determinar la sensibilidad de aislados de B. cinerea en viveros de Eucalyptus spp. a cyprodinil + fludioxonil y su relación con genotipos y fenotipos presentes. Fueron colectados 45 aislados de B. cinerea desde dos viveros de la Región del Biobío (Quinchamalí y Yumbel). Se determinó la sensibilidad de los aislados en seis concentraciones del producto comercial (desde 0 a 0,25 μg·mL-1 ) en medio Sisler, incubado a 24oC, por 4 días, y midiéndose el crecimiento de la colonia. La CE50 se obtuvo mediante análisis Probit, utilizando el software Minitab 12.1, siendo el punto crítico de sensibilidad CE50 de 0,1 μg·mL- 1 . La genotipificación se realizó mediante detección de elementos transponibles y la fenotipificación se realizó determinando crecimiento de micelial, esporulación y producción de esclerocios del hongo. La agresividad se evaluó en discos de hojas verdes y secos de E. globulus y E. nitens. La sensibilidad de los aislados de B. cinerea a la mezcla fluctuó entre 0.0003 μg·mL-1 y 3 μg·mL-1 , constatándose una pérdida de sensibilidad en el 17,7% de los aislados. Fueron detectados todos los genotipos con predominancia de transposa (55,5%) y con mayor frecuencia en vivero de Quinchamalí. Los aislados sensibles presentaron mayor capacidad de crecimiento, esporulación, producción de esclerocios y agresividad que la registrada en los aislados resistentes. Este estudio constituye el primer reporte de pérdida de sensibilidad a la mezcla en viveros de eucalipto.

    Agradecimientos: Forestal Mininco S.A., Sr. Francisco Rodríguez. Vivero Proplanta, Sr. Leopoldo Quezada.

    Comunicaciones Orales

    Determinación de la sensibilidad de Alternaria solani a los fungicidas QoI, boscalid y difenoconazole in vitro y su relación con la sustitución F129L

    Sensitivity determination of Alternaria solani to QoI, boscalid and difenoconazole fungicides in vitro and its relation with F129L substitution Camila Sandoval; Ivette Acuña; Sandra Mancilla; Mincy Vargas Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue. E-Mail: camila.sandoval@inia.cl

    Tizón temprano causado por Alternaria solani, es la segunda enfermedad de follaje más importante en el cultivo de papa en la zona sur del país, ocasionando pérdidas de hasta un 30% en cultivares susceptibles. Para controlar a este hongo, comúnmente, se utilizan fungicidas basados en estrobirulinas, los cuales inhiben la respiración mitocondrial por unión al sitio Qo del complejo citocromo b (cytb). Debido a su sitio de acción único y específico, estos productos son vulnerables a la evolución de resistencia a fungidas, reportándose en los últimos años pérdida de sensibilidad de A. solani a QoI en Europa y Estados Unidos, asociada a la sustitución F129L en el gen que codifica para cytb. El objetivo de este trabajo fue determinar la sensibilidad de A. solani a fungicidas QoI, boscalid y difeconazole in vitro y su relación con la sustitución F129L. Los aislamientos utilizados fueron obtenidos desde lesiones de hojas de papa e identificados mediante análisis morfológico y molecular para luego determinar su sensibilidad a azoxystrobin y pyraclostrobin mediante ensayos de germinación conidial utilizando 0-0,01-0,1-1 y 10 ppm en el medio de cultivo. Asimismo, se evaluó el crecimiento micelial frente a los productos boscalid y difenoconazole, obteniéndose que todos los aislamientos de A. solani evaluados resultaron ser altamente sensibles a estos fungicidas. Complementariamente, se monitorearon los genotipos de este patógeno y la presencia de la mutación F129L utilizando partidores específicos, seguido de secuenciación. Se detectó la presencia de los genotipos I y II, descritos tanto en Europa y Estados Unidos, pero no la mutación F129L, asociada a la pérdida de sensibilidad a QoI, lo cual concuerda con los resultados obtenidos en las pruebas de resistencia a fungicidas. Esta información constituye la línea base ante posibles futuros cambios en la resistencia a QoI de A. solani asociadas al cultivo de papa en Chile.

    Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la innovación Agraria FIA a través del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

    Comunicaciones Orales

    Evaluación de la interacción susceptibilidad varietal y dosis de fungicida en el control de Tizón tardío (Phytophthora infestans) en el cultivo de la papa

    Efficiency assessment of cultivar susceptibility and fungicide doses interaction for Late blight (Phytophthora infestans) control in the potato crop Ivette Acuña; María Paz Castro; Pamela Tejeda; Fabiola Cádiz; Mincy Vargas Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue E-Mail: iacuna@inia.cl

    Phytophthora infestans, agente causal del Tizón tardío de la papa, es la enfermedad más seria en este cultivo, debido a su alta capacidad destructiva, al infectar tanto hojas, como tallos y tubérculos, cubriendo una gran superficie al existir condiciones medioambientales favorables, llegando a disminuir en más de 50% los rendimientos. El control del patógeno, entre otros, está basado en la utilización de cultivares resistentes y la aplicación de fungicidas. Con el objetivo de evaluar la interacción de la resistencia varietal y el control químico sobre la severidad del Tizón tardío, se establecieron parcelas experimentales en INIA Remehue, Osorno, durante cuatro temporadas (2011/12, 2012/12, 2013/14 y 2014/15). Las parcelas fueron establecidas en un diseño de parcelas divididas en bloques completos al azar, utilizando los cultivares Symfonia, Patagonia y Yagana (resistente, medianamente resistente y susceptible, respectivamente) como sub parcelas y diferentes dosis de fungicidas como parcelas principales (0, 50, 75 y 100% de la dosis comerciales). En las cuatro temporadas evaluadas se determinó diferencias estadísticas entre los cultivares para la severidad del daño, en donde Symfonia mostró los menores niveles de daño, seguido por Patagonia y Yagana. A su vez se determinó interacciones significativas entre dosis y resistencia varietal. Así, según las condiciones de la temporada y presión de la enfermedad, es posible llegar a disminuir en un 50% la dosis de fungicida recomendada en cultivares resistentes, para obtener niveles de protección similares a las dosis de 100% en cultivares susceptibles. Los resultados obtenidos en los experimentos dejan de manifiesto la importancia de la utilización de cultivares resistentes a la enfermedad, con el objeto de evitar el desarrollo severo del patógeno sobre el cultivo. La utilización de estos cultivares, enmarcado dentro del Manejo Integrado de Enfermedades, permite disminuir la utilización de agroquímicos, reduciendo los costos y el impacto en el medio ambiente.

    Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la innovación Agraria FIA a través del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

    Comunicaciones Orales

    Sedaxane: Nueva molécula fungicida de Syngenta exclusiva para la desinfección de semillas en distintos cultivos

    Sedaxane: New fungicide from Syngenta, exclusive for seed treatment on several crops Santiago Valdés Syngenta Chile E-Mail: santiago.valdes@syngenta.com

    La etapa entre la siembra y la emergencia del cultivo es donde la planta está en su estado más vulnerable y el ataque de patógenos tiene un alto impacto en la productividad. El uso de desinfectantes de semillas es una práctica habitual; sin embargo, generalmente se utilizan productos que se aplican de manera foliar con dosis adaptadas. El uso racional de fitosanitarios y la constante innovación son parte integral de la visión de Syngenta. Sedaxane es un ingrediente activo diseñado y destinado especialmente para el tratamiento de semillas, pertenece a la familia química de los inhibidores de la enzima succinato deshidrogenasa, tiene un amplio espectro de acción y se caracteriza por actuar eficientemente contra Rhizoctonia en distintos cultivos, controlando la mayoría de los grupos de anastomosis; posee una acción sistémicas y forma un halo protector a nivel de suelo, lo que le permite proteger el desarrollo inicial de la planta.

    Vibrance Integral (Sedaxane, Fludioxonil, Difenoconazole y Thiametoxam) está registrado para su uso en Trigo y cebada. Ensayos realizados en distintas temporadas demostraron un excelente control en enfermedades de suelo y semilla como Rhizoctonia, Fusarium, carbón hediondo (Tilletia foetida), Septoria (Mycosphaerella graminícola) en trigo y Rincosporiosis (Rhynchosporium secalis) en cebada. Al mismo tiempo al tener incorporado un insecticida tiene excelente control en áfidos. Aumentando la productividad en 4,8 qqm/ha respecto a otros estándares comerciales en un promedio de más de 20 localidades.

    Vibrance 500 FS (basado exclusivamente en Sedaxane) ha mostrado un excelente control de carbón de la panoja (Sphacelotheca reiliana) en maíz. En papas está indicado para el control de Rizoctonia (Rhizoctonia solani), observándose en los distintos ensayos niveles de control en tallos superiores a tratamientos estándares en más de un 40%. El excelente control en estolones permitió obtener una mayor cantidad de tubérculos aumentando de la productividad promedio en más de un 8% respecto a otros estándares comerciales.

    Comunicaciones Orales

    Estrategia de control biológico para el control de pudrición gris y pudrición del racimo de uva de mesa

    Biological control strategy for the control of gray mold and bunch rot in table grapes Fabiola Cádiz; Eduardo Salgado; Ximena Besoain Pontificia Universidad Católica de Valparaíso, Facultad de Ciencias Agronómicas y de los Alimentos, Escuela de Agronomía, Laboratorio de Fitopatología E-Mail: fabiola.cadiz@pucv.cl

    Pudrición gris, causado por Botrytis cinerea y pudrición del racimo, causado por un complejo de hongos formado por los géneros Aspergillus, Botrytis, Penicillium y Rhizopus, son importantes enfermedades que afectan a la uva de mesa y representan un desafío para un manejo integrado u orgánico de estas enfermedades. Con el propósito de desarrollar un producto biológico con actividad antimicrobiana sobre los agentes causantes de pudrición gris y pudrición del racimo, se llevó a cabo una serie de ensayos in vivo sobre bayas de uva de mesa cv. Red Globe. Se evaluaron dos microorganismos, que por razones de protección de propiedad intelectual serán denominados mc1 (microorganismo 1) y mc2 (microorganismo 2). Los microorganismos fueron probados como medida de control preventivo, por separados, en mezcla y en diferentes concentraciones (concentración alta y baja), sobre cada uno de los patógenos causantes de las enfermedades mencionadas. Primero se inocularon mc1 y mc2 y 24 horas después los hongos patógenos. La evaluación se realizó a los 4 y 15 días post inoculación. Las diferencias entre los tratamientos fueron analizadas mediante ANOVA y comparadas a través del test de Tukey (p < 0,05). Tanto el mc1 como el mc2 tuvieron efecto de control sobre los patógenos inhibiendo significativamente el desarrollo de los hongos en relación al testigo. El mc1 logró mayor efecto de control que el mc2, para todos los patógenos. Sin embargo, al mezclar ambos microorganismos el efecto de control se vio potenciado en relación al efecto de cada microorganismo por separado. Así se logró un sinergismo entre los mc1 y mc2. Por otra parte, se comprobó la persistencia de control sobre los agentes patógenos por al menos 15 días post inoculación. Finalmente, no se observaron diferencias estadísticas entre las concentraciones altas y bajas de los microorganismos evaluados en relación a su eficacia de control.

    Agradecimientos: Proyecto Innova Corfo Línea 4, código14IDL4-30322.

    Comunicaciones Orales

    Mezclas antagonistas para control de Neofusicoccum australe y Diplodia seriata en vid vinífera cv. Cabernet Sauvignon

    Antagonist mixtures for the control of Neofusicoccum australe and Diplodia seriata on grapevine cv. Cabernet Sauvignon Valeria Arriagada; Javiera Molina; Mauricio Ramírez; Jaime Auger; Luz M. Pérez; Jaime Montealegre Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile E-Mail: vale.arriagada.g@gmail.com

    El control de patógenos de la madera de la vid como Neofussicoccum australe y Diplodia seriata, se realiza a través del uso de fungicidas químicos y de labores culturales. La demanda de una alternativa de control sustentable ha generado la necesidad de encontrar antagonistas que puedan controlar efectivamente a estos hongos que penetran a la planta, principalmente a través de las heridas de poda. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la capacidad de mezclas de antagonistas bacterianos y fungosos en el control de N. australe y D. seriata en estacas y plantas de vid del cultivar Cabernet Sauvignon. Se realizaron tres experimentos, uno con estacas no enraizadas bajo condiciones de invernadero y dos con plantas de vid a nivel de campo. Cortes de poda frescos se trataron con las mezclas Bac1, Bac3 y Fun1, un producto de biocontrol comercial y una formulación comercial de tiofanato de metilo y se inocularon con conidias de N. australe y D. seriata. El nivel de control se determinó evaluando el porcentaje de desarrollo de la lesión y porcentaje de incidencia de N. australe y D. seriata en lesiones asintomáticas. Los resultados se analizaron por ANOVA, y en caso de existir diferencias estadísticas, se aplicó el test de Fisher (LSD). El porcentaje de desarrollo de la lesión fue muy variable y no se determinaron diferencias significativas entre los tratamientos. El porcentaje de incidencia de N. australe y D. seriata en lesiones asintomáticas permitió identificar diferencias significativas entre los tratamientos, siendo la mezcla Fun1 el tratamiento más efectivo, con un 0% de incidencia de recuperación de ambos patógenos, tanto a nivel de invernadero como de campo. En conclusión, la mezcla antagonista Fun1 es una alternativa eficaz para la protección de heridas de poda al ataque de estos fitopatógenos en plantas de vid.

    Agradecimiento: Financiado por FONDEF IDea Nº CA 13I-10035

    Comunicaciones Orales

    Capacidad antagónica in vitro e identificación molecular de microorganismos aislados de un suelo y un compost supresivo a caída de plantas

    Antagonistic capacity and molecular identification of microorganisms isolated from soil and compost suppressive to damping-off Violeta Muñoz1 ; Paz Millas2 ; Ernesto Moya-Elizondo1 ; Marisol Vargas1 1Universidad de Concepción, Facultad de Agronomía 2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Quilamapu E-Mail: violetamunoz@udec.cl

    El control biológico de enfermedades del suelo es una interesante alternativa para disminuir el uso de pesticida químicos en la agricultura. En este marco, el uso de sustratos supresivos a enfermedades ha ganado un creciente interés entre científicos y agricultores. La supresividad es atribuida a microorganismos (MO) que habitan en estos sustratos, los cuales inhiben el crecimiento de patógenos mediante diversos mecanismos de antagonismo. Con el objetivo de aislar MO antagonistas frente a Rhizoctonia solani y Pythium ultimum, se realizaron diluciones seriadas a partir de un suelo y un compost supresivo a caída de plántulas, las que fueron sembradas en medios de cultivo no selectivos y selectivos para Pseudomonas, Bacillus, Trichoderma y actinobacterias. Para determinar la actividad antagonista in vitro de los aislados se evaluó la competencia a través del porcentaje de inhibición del crecimiento (PIC) micelial en cultivo dual y la acción de metabolitos antifúngicos a través del PIC radial. Además, en el caso de hongos la actividad antagonista se clasificó utilizando la escala de Bell y se evaluó micoparasitismo. Los MO antagonistas fueron identificados molecularmente utilizando partidores universales para hongos y bacterias. Para las variables de PIC micelial y radial se realizó un análisis de conglomerados. De 80 MO aislados, 17 inhibieron el crecimiento micelial de R. solani entre 21 y 73% y 13 de P. ultimum entre 16 y 53%. A su vez, tres hongos mostraron signos de parasitismo frente a ambos patógenos y 11 inhibieron entre 11 y 80% el crecimiento radial de R. solani por medio de metabolitos volátiles. Los MO antagonistas destacados pertenecieron a los géneros Bacillus, Streptomyces, Penicillium y Aspergillus. Por lo tanto, se concluye que sustratos supresivos son fuente de MO antagonistas que inhiben a patógenos mediante diversos mecanismos de acción.

    Agradecimientos: Financiamiento Proyecto Fondecyt Iniciación 11121273.

    Comunicaciones Orales

    Hongos patógenos asociados a malezas Genista monspessulana y Cytisus scoparius y susceptibilidad en especies de interés forestal

    Pathogenic fungi associated to weeds Genista monspessulana and Cytisus scoparius and susceptibility of forest interest species Felipe Balocchi; Eugenio Sanfuentes Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Forestales, Centro de Biotecnología, Laboratorio de Patología Forestal, Concepción, Chile E-Mail: esanfuen@udec.cl

    Entre los principales problemas que afectan a las plantaciones forestales se encuentra la competencia con malezas, cuyo efecto es especialmente severo en las plantaciones jóvenes (1-3 años). Las especies Genista monspessulana (L.) L.A.S.Johnson y Cytisus scoparius (L.) Link están dentro de las malezas con mayor impacto en plantaciones forestales y los métodos de control disponibles están siendo restringidos debido a normativas ambientales. El control biológico de malezas con microorganismos fitopatógenos presentes en malezas es poco estudiado y puede ser una alternativa para solucionar este problema. El objetivo de este estudio fue determinar la ocurrencia de patógenos en G. monspessulana y C. scoparius, y la susceptibilidad de Pinus radiata y Eucalyptus globulus a estos agentes. Fueron realizadas prospecciones a plantaciones forestales infestadas por estas malezas en las provincias de Arauco y Concepción colectándose plantas con síntomas y/o signos de ataque por hongos. Desde plantas sintomáticas fueron efectuados aislamientos en diferentes medios de cultivo. En condiciones de invernadero, plantas de seis meses de C. scoparius y de G. monspessulana fueron inoculadas utilizando disco de micelio en el tallo, evaluándose mortalidad y tamaño de lesión, en un diseño completamente al azar. Los aislados patogénicos fueron identificados mediante secuenciación de fragmentos amplificados con partidores ITS1/ITS4, e inoculados en plantas de P. radiata y E. globulus de 10 y 8 meses, respectivamente, como también en ambas malezas. Entre 37 hongos aislados Fusarium solani, F. sambucinum, Neofusicoccum parvum y Phytophthora multivora fueron patógenos a C. scoparius, mientras que Chondrostereum purpureum, N. parvum y F. tricinctum, lo fue a G. monspessulana. En P. radiata y E. globulus sólo F. sambucinum y P. multivora fueron inocuos, mientras que N. parvum fue patógeno sólo en E. globulus. Estos resultados sugieren que algunos patógenos presentan cierto potencial para ser desarrollados como bioherbicidas, aunque estudios adicionales son requeridos para dilucidar esta posibilidad.

    Agradecimientos: Forestal Mininco S.A., Innova Bío-Bío Proyecto 12.288-EM.TES.

    Comunicaciones Orales

    Evaluación de la eficacia de los productos biológicos Coraza® y Mamull®, en el control de enfermedades de madera, en vides

    Evaluation of the biological products Coraza® and Mamull®, in the control of wood decay diseases in grape Eduardo Donoso; Walter Hettich; José Manuel Caballero; Claudio Valdés; Jorge Bratti Bio Insumos Nativa SPA, Talca E-Mail: edonoso@bionativa.cl

    Diversos controladores biológicos han mostrado efectos en el control in vivo de patógenos causantes de enfermedades de madera, como son Neofusicocum australe, Phaemoniella chlamydospora. Las que causan importantes daños en cultivos de vid, tanto de mesa como vinífera. Frente a esto se planteó la realización de dos ensayos de campo, con inoculación artificial, en los que en plantas de vid Cabernet Sauvignon de 20 años, se evaluó en un diseño factorial, el efecto de diversos tratamiento y diámetros de corte (1-2 mm; 1,5; 2,5 y 3,5 cm), sobre los que se realizaron inoculaciones de Neofusicocum australe y Phaemoniella chlamydospora. Similarmente, en plantas del mismo cuartel, se realizaron cortes de poda, que fueron inoculados con los patógenos indicados, y se realizaron aplicaciones de los tratamientos a las 0, 24, 48, 72 y 96 horas post inoculación. Evaluándose en ambos ensayos 7 meses después, el largo de lesión en los puntos de corte inoculados.

    Los resultados indican un efecto de control significativo de la pasta biológica para cortes desde 1,5 a 3,5 cm de diámetro para Neofusicocum (P<0,01) y lo mismo para P. chlamydospora (P<0,001), los cortes menores no mostraron presencia de síntomas o presencia de los patógenos. Mientras que la formulación asperjable mostro un efecto adecuado para ambos patógenos pero solo hasta cortes de 2,5 cm de diámetro. En cuanto a tiempo residual, se observa que la formulación en pasta logra niveles de control del 100% cuando se aplica con 24 horas post inoculación y con un efecto significativo (P<0,05) hasta 72 horas post inoculación de Neofusicocum o Phaemoniella, mientras que el asperjable, muestra efecto retroactivo de solo 48 horas. Presentándose ambos productos como potenciales herramientas de control a nivel de campo.

    Comunicaciones Orales

    Evaluación de Coraza® en la extinción de cancros causados por Pseudomonas syringae en Cerezo

    Evaluation of Coraza® in the extinction of cankers produced by Pseudomonas syringae in Cherry trees Eduardo Donoso; Walter Hettich; José Manuel Caballero; Claudio Valdés; Jorge Bratti Bio Insumos Nativa SPA, Talca E-Mail: edonoso@bionativa.cl

    El cáncer bacterial es la principal enfermedad que afecta al cerezo, generando pérdidas por atizonamiento de yemas y flores como muerte de plantas a causa de cancros en la madera. Frente al primer tipo de daño se cuenta con múltiples herramientas eficaces, como son productos cúpricos y antibióticos, pero para el manejo de los cancros solo se han planteado alternativas paliativas que consistían en la cauterización de los cancros. Durante varias temporadas, se ha evaluado el efecto de aplicaciones de una formulación en pasta, de cepas de hongos y bacterias biocontroladoras, las que han mostrado un efecto significativo de control. Para validar estas experiencias de campo, se planteó un ensayo con un diseño completamente al azar, se seleccionaron plantas de cerezo en un huerto en la Provincia de Linares de 7 años, con presencia de cancros activos. Previo a la aplicación de los tratamientos (junio de 2012), se midió el diámetro de cada cancro y se registró su ubicación. Posteriormente durante el otoño de 2013, se realizó la aplicación de los tratamientos control sin aplicaciones, tratamiento comercial Polisulfuro de calcio (10 kg/ha) seguido de pintura de poda o Coraza. En diciembre de 2012, se evaluó la presencia de cancros activos, variación de tamaño y presencia de callo, considerado como síntoma de cicatrización. Los resultados indican, que tanto Coraza como el manejo del huerto lograron una reducción de número de cancros activos (P<0,05), Coraza, logra una reducción significativa del tamaño de los cancros (P<0,05) así como una mayor frecuencia del proceso de cicatrización (P<0,01), diferenciándose significativamente del manejo químico, el seguimiento posterior de los árboles, indican una recuperación de vigor de las plantas, así como una recuperación del diámetro de tronco, pese a lo promisorio de estos resultados, no es posible eliminar la presencia endófita de Pseudomonas de los arboles tratados.

    Comunicaciones Orales

    Elicitación de respuesta defensiva en plántulas de vid cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay

    Elicitation of defense response in vine seedlings cvs. Cabernet Sauvignon and Chardonnay Luz M. Pérez1 ; Juan C. Ríos2 ; Valeria Arriagada1 ; Mauricio Ramírez1 ; Jaime Montealegre1 1 Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile 2Universidad de Los Lagos E-Mail: luzmitaproepke@gmail.com

    La enfermedad del brazo muerto de la vid es causada por diferentes géneros de hongos de la familia Botryosphaeriaceae, de importancia creciente en ciertas zonas de cultivo a nivel mundial. Su control se realiza a través de métodos culturales y aplicaciones preventivas de fungicidas formulados para aplicación directa sobre cortes de poda. En la búsqueda de antagonistas biológicos para el control de patógenos de la vid, nuestro laboratorio seleccionó hongos y bacterias antagonistas a Neofusicoccum australe y Diplodia seriata. El objetivo de este trabajo fue establecer si uno de los antagonistas seleccionados, Trizian 1, tenía además de poseer la característica de controlar a estos fitopatógenos, poseer la capacidad de elicitar una respuesta defensiva en plantas de vid. Para ello se germinaron semillas de vid de los cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay en bandejas que contenían una mezcla de suelo/perlita/fibra de coco, se regaron por capilaridad, y se mantuvieron a 20°C en invernadero bajo luz natural. Cuando las plántulas alcanzaron un estado de desarrollo de dos hojas verdaderas, se inocularon con una suspensión de 1x106 conidias mL-1 de Trizian 1. A diferentes tiempos desde la inoculación, se prepararon homogeneizados en los que se cuantificó espectrofotométricamente la actividad de enzimas que se inducen cuando existe elicitación de defensa (Fenilalanina amonio liasa (PAL), endoquitinasas y endoglucanasas). Los resultados mostraron una respuesta elicitora de Trizian 1 mediante la inducción de PAL, de diferente magnitud, en plántulas de ambos cvs., mientras que solamente el cv. Chardonnay indujo a las endoquitinasas y endoglucanasas. Los resultados permiten concluir que las diferencias genéticas entre los cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay se manifiestan en la diferencia de respuesta observada frente a Trizian 1 y se relacionan con antecedentes sobre la diferente susceptibilidad al ataque por patógenos de la madera de estos dos cultivares.

    Agradecimiento: Financiado por FONDEF-IDeA Nº CA 13I-10035.

    Comunicaciones Orales

    Antagonistas fúngico y bacteriano sobre hongos de la familia Botryosphaeriaceae promueven desarrollo en plántulas de vid cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay

    Fungal and bacterial antagonists on Botryosphaeria fungi promote development in vine seedlings cvs. Cabernet Sauvignon and Chardonnay Luz M. Pérez; Valeria Arriagada; Mauricio Ramírez; Javiera Molina; Jaime Montealegre Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile E-Mail: luzmitaproepke@gmail.com

    Diferentes hongos de la familia Botryosphaeriaceae son los agentes causales de la enfermedad del brazo muerto de la vid. Actualmente se controlan mediante métodos culturales y aplicaciones preventivas de fungicidas, formulados para aplicación directa sobre cortes de poda. Nuestro laboratorio ha estado interesado en la búsqueda de antagonistas biológicos eficaces para el control de hongos patógenos de la madera de la vid, y ha seleccionado hongos y bacterias capaces de controlar el desarrollo de Neofusicoccum australe y de Diplodia seriata. El objetivo de este trabajo fue establecer si estos antagonistas tenían además, la capacidad de promover el desarrollo de las plantas de vid. Para ello se sembraron semillas de vid de los cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay en bandejas que contenían una mezcla de suelo/perlita/fibra de coco, y se sometieron a diferentes tratamientos. Estos incluyeron inoculación de semillas, inoculación del suelo, riego con el inoculante, y sus combinaciones. Los inoculantes usados fueron FUN1 y Bac3. Los controles se realizaron en ausencia de inoculantes. El riego se realizó por capilaridad. Las bandejas se mantuvieron en invernadero a 20°C bajo luz natural. Al finalizar el ensayo (3 meses) se evaluó: longitud total, longitud de raíz, peso fresco y peso seco de plántulas. Los resultados mostraron que Bac3 tiene un mejor efecto promotor de crecimiento que FUN1 en plántulas de vid del cv. Cabernet Sauvignon, y que ambos promueven en magnitudes semejantes el desarrollo en plántulas de vid del cv. Chardonnay, reflejado en el aumento en la masa de las plántulas expresada en los pesos fresco y seco. La diferencia genética entre ambos cvs. puede explicar la diferente respuesta en promoción de crecimiento frente a los biocontroladores usados.

    Agradecimientos: Financiado por FONDEF-IDeA Nº CA 13I-10035.

    Comunicaciones Orales

    Relaciones ecológicas entre comunidades fúngicas de la corona de trigo y genotipos de Pseudomonas spp. productoras de 2,4-diacetilfloroglucinol (2,4 DAPG) y fenazina (PCA)

    Ecological relationships between fungal communities of the crown and genotypes of 2,4-DAPG and phenazine-producing Pseudomonas bacteria Herman Doussoulin1 ; Nolberto Arismendi2 ; Ernesto Moya-Elizondo2 1 Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Austral de Chile 2Departamento de Producción Vegetal, Facultad de Agronomía, Universidad de Concepción E-Mail: hdoussoulin@gmail.com

    Bacterias Pseudomonas productoras de 2,4-diacetilfloroglucinol (2,4-DAPG) y fenazina (PCA) han sido asociadas al control de fitopatógenos del trigo (Triticum aestivum L.); sin embargo, la relación entre comunidades de fitopatógenos y la presencia de este tipo de bacterias ha sido poco estudiada. Se evaluó la frecuencia de especies de hongos asociadas al primer internudo de tallos de trigo, la incidencia y severidad que causan, y su relación con la presencia de Pseudomonas productoras de 2,4-DAPG y PCA en cuatro sementeras comerciales de trigo en la Región de La Araucanía y Los Lagos, durante dos temporadas de cultivo. Porciones del primer internudo de tallos fueron sembradas en medio de cultivo para aislamiento de hongos, mientras que las raíces se utilizaron para detectar Pseudomonas spp. productoras de 2,4 DAPG y PCA mediante PCR con partidores específicos del gen phlD y phzCD. Géneros de hongos Phaeosphaeria, Fusarium, Microdochium y Rhizoctonia fueron frecuentemente aislados (52,6; 22,1; 7,8 y 4,9%, respectivamente). Se detectó la presencia de los grupos genéticos A, B, D, K, L y P asociados al gen phlD, variando la composición genética entre predios y periodos en que se realizó el muestreo. La presencia de bacterias productoras de 2,4 DAPG y PCA benefició la sanidad del cultivo, relacionándose su presencia con un aumento del rendimiento y altura de plantas y una reducción de la incidencia y severidad de daño por microorganismos en el primer internudo, asociado a un efecto sinérgico con la diversidad de microorganismos en aquellos predios con mayor diversidad de hongos en la corona. Este estudio entrega información relevante sobre la diversidad fúngica asociada a la corona del trigo, los genotipos de Pseudomonas 2,4-DAPG presentes y las relaciones existentes entre ambos grupos de microorganismos y la sanidad del cultivo de trigo bajo condiciones del sur de Chile.

    Agradecimientos: Trabajo financiado por Proyecto Fondecyt de Iniciación N°11110105.

    Comunicaciones Orales

    Evaluación de cuatro biofungicidas y dos aislamientos del género Trichoderma contra Botrytis cinérea

    Evaluation of four biofungicides and two isolates of the genus Trichoderma against to Botrytis cinérea Paulo García; Germán Melo Universidad Santo Tomas, Grupo de Gestión Ambiental y de los Recursos Naturales en Colombia. Programa Administración Ambiental y de los recursos Naturales. Facultad de Ciencias y Tecnologías E-Mail: paulogarcia@ustadistancia.edu.co

    El moho gris es una enfermedad cosmopolita y limitante del cultivo y la poscosecha de la rosa en Colombia; por lo que se propuso como principal objeto, establecer una prueba ¨in planta¨ en tallos de rosa tiernos (Rosa spp. variedad Vendela) para la evaluación de eficacia de los biofungicidas Rhapsody® (i.a. Bacillus subtilis cepa QST 713/dosis 7,5 ml.l-1 ), Botector® (i.a. Aureobasidium pullulans cepas DSM 14940 y DSM 14941/dosis 1,0 y 2,0 ml.l-1 ), Foliguard® (i.a. Trichoderma harzianum cepa DSM 14944/dosis 1,0 ml.l-1 ), Mycobac® (i.a. Trichoderma lignorum/dosis 1,2 g.l-1 ); dos aislamientos nativos del género Trichoderma USTA_Tri-004 y USTA_Tri-006 respectivamente; y como controles comerciales los fungicidas Sportak® (i.a. Prochloraz/dosis 0,8 g.l-1 ) y Cabo® (i.a. Fenhexamida/dosis 1,0 g.l-1 ). Todos los tratamientos evaluados, presentaron valores de lesión significativamente menores que el testigo fitopatógeno. El biofungicida Botector®, el aislamiento USTA_Tri-004, y los fungicidas Sportak® y Cabo® respectivamente alcanzaron un 100% de protección contra el moho gris. De otra parte los tratamientos correspondientes a los biofungicidas Foliguard®, Mycobac®, y aislamiento USTA-Tri_006 alcanzaron una protección superior al 85% contra B. cinerea; en contraste con el biofungicida Rhapsody® con el que solo se alcanzó un 63% de protección. Los resultados demuestran de forma consistente, la inhibición de síntomas y signos producidos por el moho gris en el presente modelo ¨in planta¨, por efectos de aplicación de los biofungicidas Botector®, Foliguard®, Mycobac® y los aislamientos USTA_Tri004 y USTA_Tri006, debido posiblemente a su interacción antagónica con el fitopatógeno, basado en el micoparasitismo, competencia por espacio o nutrientes y antibiosis.

    Agradecimientos: Al cuerpo docente del programa Administración Ambiental y de los Recursos Naturales de la Facultad de Ciencias y Tecnologías (VUAD), y al personal coordinador del Laboratorio de Microbiología de la Universidad Santo Tomas en Bogotá.

    Comunicaciones Orales

    Identificación de especies del género Meloiodgyne en el Valle Central de Chile y su interacción con portainjertos de frutales de Carozo

    Identification of Meloidogyne species from the Central Valley of Chile and interaction with stone fruits rootstocks Pablo Meza1 ; Braulio Soto1 ; Luis Rojas1 ; Daniel Esmenjaud2 1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional La Platina 2UMR Institut Sophia Agrobiotech (ISA), INRA, France E-Mail: pablo.meza@inia.cl

    Los nematodos del género Meloidogyne (RKNs) son considerados unos de los más dañinos en el mundo. En frutales de carozo pueden ocasionar pérdidas cercanas al 15%. Con el objetivo de identificar las especies de Meloidogyne spp. en el Valle Central de Chile se colectaron 20 poblaciones entre las regiones V y VII, las que fueron caracterizadas con marcadores moleculares e isoenzimáticos. Las especies identificadas correspondieron a M. ethiopica (75%), M. javanica (15%) y M. arenaria (10%). Esto confirma la amplia distribución de M. ethiopica en el País. Posteriormente, de cada población se obtuvieron 10.000 huevos para inocular dos portainjertos descritos como resistentes, Nemaguard (Prunus persica x P. davidiana) y Marianna 2624 (P. cerasifera x P. munsoniana), y un susceptible, Pomona (P. persica). Luego de 5 meses se evaluó el agallamiento del sistema radical y el número de nematodos por planta. El análisis estadístico utilizó un diseño completamente aleatorio con 5 repeticiones. El portainjerto Pomona mostró resistencia a algunos aislados de RKNs, mientras que Nemaguard presentó una mayor resistencia frente a M. arenaria. Por su parte, el patrón Marianna 2624 fue inmune a todas las poblaciones. Nuestros resultados demuestran que los portainjertos de Prunus spp. pueden expresar diferentes niveles de resistencia frente a RKNs. Esta resistencia puede ser activa tanto a nivel de aislado (Pomona), a nivel de especie (Nemaguard) o a nivel de género (Marianna 2624).

    Agradecimientos: Proyecto Fondecyt N° 11121209

    Comunicaciones Orales

    Riesgo de infestación por Nemátodo dorado, en predios de la agricultura familiar campesina del área libre de enfermedades cuarentenarias de la papa

    Golden cyst nematode infestation risk, in small scale farming, at the pest quarantine free area for the potato crop Manuel Muñoz; Pamela Tejeda; Ivette Acuña; Andrés France Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue, Programa de Mejoramiento Genético de papa (PMGP-INIA) E-Mail: manuel.munozd@inia.cl

    El Nemátodo dorado de la papa (Globodera rostochiensis Woll.) es una importante plaga cuarentenaria y de difícil erradicación en suelos infestados. En Chile, si bien se encontraba confinada en la zona centro norte, durante los últimos años se han reportado focos en el área libre, constituyendo un riesgo permanente para la zona productora de semilla de papa del país. Se disemina por el uso de tubérculo infestado usado como semilla y por movimiento de suelo portador del parásito. La susceptibilidad de las variedades empleadas determina la tasa de incremento poblacional una vez introducido el parásito en un predio. El objetivo del trabajo fue recopilar información sobre el manejo del cultivo de papa efectuado por pequeños agricultores, relacionada con el origen de la semilla, variedades empleadas y limpieza de maquinaria y herramientas, con el fin de evaluar el riesgo de diseminación de esta plaga hacia zonas limpias. Se aplicó una encuesta a 80 pequeños agricultores y se obtuvo información desde bases de datos INIA de otros 122 productores de la agricultura familiar campesina (AFC), ubicados en el área libre de plagas cuarentenarias. Un 90,1% de los agricultores utilizan semilla propia que no ha pasado por procesos de certificación. Un 62,3% utilizan la variedad Desirée (susceptible a Nemátodo dorado) y un porcentaje menor, variedades descritas como resistentes (Karú 15,6%, Yagana 10,7%, Rodeo 6,6%). Sobre un 45% no realiza limpieza de maquinaria e implementos agrícolas antes ni después de usarlos. Además, el 60% declara tener conocimiento nulo sobre plagas cuarentenaria de la papa. Podemos concluir en forma preliminar que la AFC es un grupo de alto riesgo debido al extendido uso de semilla con baja trazabilidad, el empleo mayoritario de variedades susceptibles y la falta de conocimiento entre los agricultores, lo que impide realizar manejos adecuados para prevenir la diseminación de esta plaga.

    Agradecimientos: Financiado por Proyecto Innova Corfo Bienes públicos 14BPC4-28525.

    Comunicaciones Orales

    Detecciones relevantes de plagas fitopatológicas durante período agosto 2014 y 2015. Programa Vigilancia Fitosanitaria Agrícola, Servicio Agrícola y Ganadero

    Relevant reports of phytopathological pests since August 2014. Phytosanitary Surveillance Program, Servicio Agrícola Ganadero Fernando Torres; Claudia Vergara; María Eugenia Murillo Servicio Agrícola Ganadero (SAG), Subdepto. Sanidad Vegetal, Sección Vigilancia Fitosanitaria Agrícola E-Mail: fernando.torres@sag.gob.cl

    El SAG cuenta con un Programa de Vigilancia Fitosanitaria, cuyo objetivo es mantener actualizada la situación fitosanitaria del ámbito silvoagrícola nacional. En el ámbito agrícola, el SAG ejecuta anualmente un sistema de vigilancia territorial orientada a la detección precoz de plagas cuarentenarias, conocer la condición y distribución de las plagas relevantes presentes en Chile. Lo anterior, permite apoyar la categorización de las plagas reglamentadas y respaldar la situación de los cultivos a nivel nacional e internacional. El Sistema de Vigilancia Agrícola incluye el desarrollo de un Plan Anual de Prospecciones visuales de cultivos y de Monitoreo de plagas mediante una red de trampas con expresión nacional.

    Este trabajo tiene como objetivo informar sobre las nuevas determinaciones e incursiones producto de la vigilancia en las distintas áreas de riesgo, con énfasis en los organismos fitopatógenos cuarentenarios ausentes, durante el período agosto 2014 a agosto 2015. En dicho período, 24.843 muestras fueron examinadas en la red de laboratorios del SAG. Del total de muestras colectadas, se determinaron 10.327 plagas en las diferentes disciplinas, de las cuales 1.292 corresponden al área fitopatológica: 144 reportes bacteriológicos, 870 micológicos y 278 virológicos.

    Dentro de las determinaciones más relevantes, se identificó a High plains virus, Bean common mosaic necrotic virus, Fitoplasma 16Sr grupo XIII, subgrupo A, Apple stem grooving virus, Potato mop top virus, Dickeya solani, Dickeya dadantii, Phoma exigua var. foveata. El SAG, dentro de sus facultades, considera la implementación de medidas emergenciales para controlar las plagas cuarentenarias. Actualmente y frente a estos hallazgos, el SAG ha intensificado la vigilancia para conocer su distribución y varias de éstas se encuentran bajo medidas oficiales de erradicación o contención.

    La vigilancia fitosanitaria ha permitido identificar plagas cuarentenarias en una condición precoz que permite la adopción de medidas emergenciales y limitar el impacto económico en los cultivos hospedantes.

    Agradecimientos: Equipos del Programa de Vigilancia Fitosanitaria Agrícola sectoriales y regionales SAG, Red de Laboratorios SAG.

    Comunicaciones Orales

    Manual Interactivo de la Papa: nueva herramienta de transferencia tecnológica INIA

    Interactive Potato Manual: a new INIA technological transfer tool Ivette Acuña; Manuel Muñoz; Patricio Sandaña; Sandra Orena; Rodrigo Bravo; Julio Kalazich; Pamela Tejeda; María Paz Castro; Camila Sandoval Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue E-Mail: mp.castrot@gmail.com

    El Manual Interactivo de la Papa INIA (http://manualinia.papachile.cl) es una nueva herramienta de transferencia tecnológica desarrollada por INIA, en conjunto con el Consorcio Papa Chile S.A. y el apoyo de la Fundación para la Innovación Agraria (FIA). El objetivo principal de este manual es servir como una herramienta de apoyo tecnológico tanto para productores agrícolas, asesores técnicos, profesionales del rubro, y todos aquellos actores de la cadena productiva del cultivo de la papa. Al acceder al manual, los usuarios podrán encontrar variada y actualizada información relacionada a diversos aspectos de la producción de este cultivo, tales como: manejo agronómico, cosecha y almacenaje de tubérculos, características y usos de las variedades comerciales de papa y manejo integrado de plagas, enfermedades y malezas, entre otros. Además, cuenta con una sección especialmente dedicada a las diferentes herramientas de apoyo a toma de decisiones desarrolladas por INIA, como alertas tempranas de enfermedades y calculadora razonada tanto de fertilización como rendimiento. En conjunto a esto, los usuarios pueden acceder a una nutrida galería de imágenes ilustrativas, con sus respectivas descripciones y autorías. Una de las novedades que ofrece el manual es la interactividad que lo caracteriza, ya que los usuarios pueden visualizar imágenes y definición de conceptos dentro del mismo texto que están visitando, sin necesidad de buscar otra sección o página web, otorgando comodidad al momento de la navegación. En complemento a lo anterior, el manual se encuentra interconectado en todas sus secciones, es decir, el usuario puede transitar entre diferentes temáticas, sin la necesidad de buscarlas específicamente dentro del menú de inicio. De este modo, el Manual Interactivo de la Papa INIA brinda a los visitantes un formato amigable, cómodo y fácil de visitar, el cual sirve como una importante fuente de conocimiento e información vital para un correcto manejo del cultivo.

    Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la innovación Agraria FIA a través del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

    Comunicaciones Póster

    Eclosión de J2 de Globodera rostochiensis ante la presencia de exudados radicales de cuatro especies solanáceas

    Globodera rostochiensis J2 hatching in presence of four Solanaceae species root exudates Pedro Brintrup; Laura Böhm; Herman Doussoulin Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Austral de Chile, Valdivia E-Mail: pb393_17@hotmail.com

    Globodera rostochiensis, es uno de los patógenos más importantes de papa (Solanum tuberosum L.), considerado plaga cuarentenaria de control obligado a nivel mundial, pudiendo infestar además, pero en menor intensidad a otras solanáceas. Para iniciar su ciclo biológico G. rostochiensis requiere del exudado radical de papa, el que estimula la eclosión de J2 y la posterior penetración de raíces. El objetivo de este trabajo fue comparar el efecto, en la eclosión de J2 del nemátodo, de exudados radicales de papa cv. Desireé (testigo susceptible), tomate (S. lycopersicum) cv. “Cherry”, petunia corriente (Petunia hybrida) y ají “amarillo” (Capsicum annum). Para ello se realizó un ensayo in vitro en base a cinco tratamientos, en función de cada especie vegetal y un control con agua destilada con tres repeticiones cada uno. En portaobjetos excavado se dispusieron de a tres quistes del nemátodo a los cuales se incorporó 1mL del exudado radical correspondiente, obtenido por la metodología de Turner et al. (2009), manteniendo el ensayo en cámaras húmedas a 18 ± 2 °C durante cinco semanas; semanalmente se contabilizaba el número de J2 eclosionados, incorporando nuevamente 1 mL del exudado en cada tratamiento. Las evaluaciones se realizaron comparando el número y porcentaje de eclosión de J2 en relación al testigo papa cv. Desireé. Los resultados obtenidos indican que la eclosión efectiva de J2 desde huevos fue significativamente superior en tomate y papa, comparados con el resto de los tratamientos, lo cual refuerza que tomate constituye un hospedero alternativo a nivel de campo. Por otra parte, el tratamiento con agua destilada indujo una mayor eclosión de J2 que los exudados radicales de ají y petunia lo que significaría que ambas especies no son hospederas de G. rostochiensis.

    Agradecimientos: Los autores agradecen a la dirección de investigación de la Universidad Austral de Chile por los aportes realizados por el proyecto DID UACh S-2014-11.

    Comunicaciones Póster

    Efecto de extractos acuosos de plantas nativas chilenas en la eclosión de J2 de Globodera rostochiensis

    Globodera rostochiensis hatching effects of aqueous extract from Chilean native plants Laura Böhm; Herman Doussoulin; Erika Briceño Universidad Austral de Chile, Instituto de Producción y Sanidad Vegetal E-Mail: lbohm@uach.cl

    Los juveniles de segundo estado (J2) de Globodera rostochiensis, que inician el proceso infestivo en plantas, se forman en los huevos contenidos dentro de los quistes en respuesta a la presencia de exudados radicales de papa (ERP). La posibilidad de enmascarar el efecto ERP constituye una alternativa viable para el control del nemátodo. En la presente investigación se evaluó el efecto sobre la eclosión de J2 desde quistes del nemátodo expuestos a extractos acuosos del follaje de Aristotelia chilensis (maqui), Drymis winteri (canelo), Gevuina avellana (avellano), Laurelia sempervirens (laurel), Luma apiculata (arrayán), Maytenus boaria (maitén), y Ugni molinae (murta). El extracto acuoso base de cada especie (EB) se preparó con 10 g de polvo de hojas secas maceradas en 100 mL de agua destilada estéril durante 24 h en oscuridad y filtrada en papel Whatmann Nº1. Las diluciones de 50 y 10% se realizaron con agua destilada estéril. El ERP se obtuvo desde plantas del cultivar Desireé siguiendo metodología estándar. En vasos de precipitado de 80mL se dispusieron 15 mL de ERP y 15 mL de cada especie y concentración, insertando dentro de los vasos un tamiz conteniendo 10 quistes del nemátodo, replicando cada tratamiento cinco veces. Los tratamientos testigos correspondían a ERP y agua destilada y el ensayo se mantuvo durante ocho semanas a 20°C. Semanalmente se renovabas las suspensiones contabilizando los J2 eclosionados. Los resultados obtenidos muestran que todas las especies vegetales disminuyeron significativamente la tasa y porcentaje de eclosión de J2, efecto más marcado a partir de la tercera semana de ensayo. Coincidiendo con la literatura la formación de juveniles infestivos se vio incrementada en presencia de ERP. Los recuentos realizados una vez finalizado el ensayo mostraron que en los tratamientos conteniendo extractos de laurel, canelo y maqui, los huevos remanentes en los quistes presentaban porcentajes de destrucción superiores al 32%.

    Comunicaciones Póster

    Detección de un nuevo virus en el cultivo del ajo (Allium sativum) en Chile

    Detection of a new virus in garlic (Allium sativum) in Chile Mónica Madariaga; Isabel Ramírez; Elizabeth Kehr Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina E-Mail: mmadariaga@inia.cl

    El cultivo del ajo (Allium sativum) se ve afectado por múltiples infecciones virales de especies pertenecientes a los géneros Potyvirus, Carlavirus y Allexivirus. La propagación vegetativa del cultivo permite la permanencia de estas virosis desde una generación a otra provocando un aumento en las pérdidas del rendimiento en cada ciclo sucesivo del cultivo. En Chile se determinó en los años ´90 la presencia de Onion yellow dwarf (OYDV) afectando el cultivo. No obstante, la sintomatología que muestran las plantas de ajo en la actualidad sugieren la presencia de infecciones múltiples. El objetivo de este trabajo fue identificar la presencia de virus pertenecientes a los géneros Potyvirus, Carlavirus y Allexivirus en plantas de ajo con síntomas de clorosis y falta de crecimiento. Se colectaron muestras compuestas de hojas y se realizó una extracción de RNA utilizando RNA-Solv de acuerdo a las instrucciones del fabricante. El RNA obtenido se utilizó para generar una hebra de DNA (cDNA) en presencia de Random primers. El cDNA se amplificó mediante PCR utilizando cinco pares de patidores para la detección de potyvirus, carlavirus y allexivirus. Los resultados mostraron dos amplicones que correspondieron a la amplificación de 451 pb del genoma del carlavirus Garlic common latent virus (GarCLV) y 318 pb de la región del genoma del potyvirus OYDV, ambos fragmentos amplificados correspondieron a la región del genoma que codifica para la proteína de cubierta de los virus. Estos resultados corresponden a la primera identificación en Chile de GarCLV y corroboración de la presencia de OYDV afectando el cultivo. Ambos productos de PCR fueron enviados a secuenciar a Macrogen para posteriormente comparar las secuencias obtenidas con las disponibles en las bases de datos. La identidad de ambos virus fue corroborada mediante la prueba serológica ELISA con anticuerpos comerciales específicos para cada virus.

    Comunicaciones Póster

    Detección de Turnip mosaic virus en berro (Nasturtium officinale W.T. Aiton) en Chile

    Detection of Turnip mosaic virus in watercress (Nasturtium officinale W.T. Aiton) in Chile Isabel Ramírez; Daniela Olivares; Gabriel Saavedra; Mónica Madariaga Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina E-Mail: isabel.ramirez@inia.cl

    El Berro (Nasturtium officinale W.T. Aiton), es una planta perenne que crece a orillas de arroyos o lagunas. Es rico en vitaminas A y C, fibras y minerales, especialmente calcio, yodo y fósforo. Estas cualidades nutritivas ofrecen una alternativa interesante para la producción del cultivo para fines agroindustriales.

    El berro, al igual que otras especies vegetales, no está ajeno a infecciones causadas por virus, las cuales en la mayoría de los casos limitan el desarrollo de los cultivos. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue la identificación de virus presentes en plantas de berro y que mostraban sintomatología de mosaico. Se colectaron ocho muestras desde plantas de berro afectadas. A cada muestra se le realizó la prueba serológica Enzyme linked inmunosorbent Assay (ELISA) con anticuerpos comerciales específicos para el género Potyvirus (Agdia Inc.). Los resultados obtenidos indicaron la presencia de virus en las muestras analizadas. Para determinar la identidad del potyvirus presente, se realizó la detección mediante RT-PCR, usando los partidores universales Sprimer y M4T y se obtuvo una banda esperada de 1,7 kb. El amplicón fue purificado, insertado en vector pGEM-T y clonado. Posteriormente los plásmidos obtenidos de los clones fueron secuenciados en sentido y antisentido, obtenido una secuencia de 1709pb, la cual fue comparada mediante BLASTn con secuencias presentes en la base de dato NCBI, obteniendo un 97% de identidad con el virus Turnip mosaic virus (TuMV). Finalmente, la identidad del virus fue corroborada mediante prueba ELISA usando anticuerpos específicos para TuMV (Agdia Inc.) y además, se observaron partículas virales filamentosas de alrededor de 720 nm de largo mediante microscopía electrónica. Estos resultados corresponden a la primera determinación de virosis en el cultivo del berro en Chile.

    Comunicaciones Póster

    Detección y caracterización molecular de un fitoplasma asociado a la amarillez de la acelga (Beta vulgaris subsp. vulgaris)

    Detection and molecular characterization of a phytoplasma associated to swiss chard yellows (Beta vulgaris subsp. vulgaris) Nicola Fiore1 ; Marcelo Cabrera2 ; Maureen Pizarro2 ; Ingrid Soto3 ; Nicolás Quiroga1 ; Alan Zamorano1 1Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile 2 Servicio Agrícola y Ganadero, Laboratorios y Estaciones Cuarentenarias de Lo Aguirre, Santiago, Chile 3 Servicio Agrícola y Ganadero, Oficina de Arica y Parinacota, Arica, Chile. E-Mail: nfiore@uchile.cl

    El cultivo de la acelga en Chile se concentra en la zona central, principalmente en la Región Metropolitana y alcanzando las 600 hectáreas a nivel nacional. Por otro lado, la región de Arica y Parinacota, si bien no presenta una amplia superficie de plantación de acelga, alcanzando sólo 5 hectáreas, esta producción cubre las necesidades locales y así no se debe recurrir al mercado de la zona central, evitando el aumento de costos por transporte. Durante el año 2013, un predio de acelgas de la comuna de Arica presentó numerosas plantas con marchitez y amarillamiento severo, ocasionando pérdida de producción. Los síntomas presentaban similitudes a los observados en la enfermedad conocida como marchitez amarilla de la remolacha, causada por el fitoplasma 16SrIIIJ. Se realizaron análisis por PCR anidada para dos genes de fitoplasma (tuf y 16Sr RNA) con partidores universales. Los amplicones obtenidos fueron clonados y luego, cinco colonias fueron secuenciadas para realizar posteriormente los análisis bioinformáticos: alineamientos de secuencias, reconstrucciones filogenéticas y RFLP in silico. De las muestras analizadas, todas fueron positivas al fitoplasma pertenciente al subgrupo ribosomal 16SrIII-J. Este es el mismo agente causal de un gran número de enfermedades tanto en Chile como en Sudamérica. Adicionalmente, este es el primer reporte de una enfermedad causada por fitoplasma en acelga en el mundo.

    Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883

    Comunicaciones Póster

    Estudio de la prevalencia de infecciones causadas por viroides en una colección de Vitis vinífera

    A prevalence study of viroids infection in a Vitis vinífera collection Mónica Madariaga; Isabel Ramírez; Susana Moreno; Erika Salazar Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina E-Mail: mmadariaga@inia.cl

    Los viroides son agentes infecciosos que pueden causar graves enfermedades en las plantas, generando importantes pérdidas económicas. El cultivo de la vid no está ajeno a este tipo de infecciones. A nivel mundial se han determinado cinco viroides que lo afectan: Hop stunt viroid (HSVd), Austalian grapevine viroid (AGVd), Grapevine yellow speckle viroid-1 (GYSVd-1), Grapevine yellow speckle viroid-2 (GYSVd-2) y Citrus exocortis viroid (CEVd). En el último tiempo estos fitopatógenos, a excepción de CEVd, fueron determinados en viñedos y parronales chilenos. Su presencia muchas veces pasa desapercibida debido a que no todos ellos manifiestan síntomas. GYSVd-1, y GYSVd-2 causan un fino moteado y en co-infección con el virus Grape fan leaf virus (GFLV) generan el síndrome "vein banding disease", producto de un sinergísmo entre el virus y el viroide. El objetivo de este trabajo fue determinar la prevalencia de viroides que afectan la vid y del síndrome Vein banding disease en la colección germoplasma de Vitis vinifera de INIA-La Platina. Durante los meses de enero y febrero de 2015 se colectaron 89 muestras correspondientes a 27 variedades de vid colectadas en diversas zonas del pais, de las cuales se realizó una extracción de ácidos nucleicos totales (TNA). El TNA se utilizó como templado para sintetizar cDNA en presencia de RT-MMLV de Promega y de random primers. El cDNA obtenido se amplificó mediante un PCR múltiple para determinar la presencia de los 5 viroides mencionados. En forma paralela, se utilizó el cDNA sintetizado para amplificar un fragmento del genoma de GFLV. Los resultados indicaron una prevalencia de 94,4% para HSVd; 7,9% para AGVd; 5,6% para GYSVd-1; 25,8% para GYSVd-2, 29,2% para GYSVd-1 y/o GYSVd-2; 34,8% para GFLV y 16,9% para Vein banding disease. Este trabajo representa el primer reporte de prevalencia de viroides que afectan la vid en Chile.

    Comunicaciones Póster

    Prospección de tres virus asociados al complejo del leafroll de la vid (Grapevine leafroll associated virus) en uvas para vino de la zona Centro – Sur de Chile

    Survey of three viruses associated to the grapevine leafroll complex (Grapevine leafroll associated virus) in wine grapes in South-Central Chile Ma. Valentina Mujica1 ; Roxana Mora2 ; Marlene Rosales3 ; Claudio Sandoval4 1 Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria. Uruguay 2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación La Platina 3 Pontificia Universidad Católica de Chile 4Universidad de Talca E-Mail: vmujica@inia.org.uy

    Uno de los problemas fitopatológicos más importantes de la viticultura a nivel mundial que afectan el desarrollo, producción y calidad, son aquellos producidos por virus. El Grapevine leafroll associated virus (GLRaV) está presente en todas las áreas donde el género Vitis es cultivado. Su amplia distribución está relacionada con el modo en que las plantas son propagadas. En Chile, el primer reporte de un virus perteneciente a este complejo fue realizado en el año 1988. Sin embargo, no existen en el país antecedentes acerca de la dispersión de los virus de este complejo en cultivares destinados a la producción de vino en la zona Centro-Sur. Por esta razón, el objetivo de este trabajo fue prospectar en las variedades viníferas más importantes el grado de avance de la infección de tres virus pertenecientes a este complejo: GLRaV-1, GLRaV-2 y GLRaV-3. Muestras de Vitis vinifera sintomáticas y asintomáticas se colectaron en viñedos de la zona CentroSur, las cuales fueron analizadas para determinar la presencia de los tres virus antes mencionados. En esta zona se testearon un total de 1992 muestras a través de DAS-ELISA y los resultados obtenidos se confirmaron por RT-PCR. La tasa de infección encontrada fue de 3,4% para el GLRaV-1, 9,4% para el GLRaV-2 y 23,5% para el GLRaV-3. La tasa de infección global de los viñedos analizados fue de 36,5%. El GLRaV-1 fue el virus menos prevalente (3,4%), estado presente solo en el 2,5% de las muestras colectadas en la VI Región, 3,9% de las de la VII Región, no siendo detectado en la VIII Región. El GLRaV-2 estuvo presente en el 9,3% de las plantas muestreadas, siendo detectado en el 11,2; 8,6 y 12,9% de las muestras detectadas en la VI, VII y VIII Regiones respectivamente. Finalmente, el GLRaV-3 fue el virus más prevalente (23,4%), siendo detectado en el 33,8; 20,1 y 24,3% de las muestras colectadas en las Regiones VI, VII y VIII respectivamente.

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    XXIV Congreso de la Sociedad Chilena de Fitopatología (Diciembre 2015)

    El Centro Regional de Investigación La Platina del Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), tiene el agrado de invitar a usted a participar en el XXIV Congreso de la Sociedad Chilena de Fitopatología a desarrollarse en el centro de eventos Conference Town en la ciudad de Viña del Mar, durante los días 1, 2 y 3 de diciembre 2015.

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    Invitacion Curso de Post Grado (Marzo 2014)

    Dirección de Postgrado de la Facultad de Agronomía, Universidad de Concepción tiene el agrado de invitarle a participar del curso Dictado por el Docente invitado Gary Secor, Ph.D., Department of Plant Pathology, North Dakota State University, Fargo, USA.

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    XXII Congreso

    23, 24, 25 y 26 Septiembre, Viña del Mar. Considerando la importancia de Chile como potencia agro alimentaria, la relevancia de dar valor agregado a nuestros productos agropecuarios, el notable impacto de la investigación en biotecnología no solo para la academia sino también en otorgar aplicaciones prácticas en la industria, plantea constantes desafíos los que son abordados por diferentes instituciones que realizan investigación...

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